环境样品中的噬菌体的检测

资料来源：实验室的博士伊恩胡椒和博士查尔斯称-亚利桑那大学
演示作者：亚历克斯 Wassimi

病毒是一独特组感染真核生物和原核生物的生物实体。他们是专性寄生虫，没有代谢的能力，和来进行复制，依赖宿主代谢产生病毒在宿主细胞内自组装的零件。

病毒是超微 — — 太小，无法进行光镜观察，可见只有与更大的分辨率的电子显微镜下查看。病毒粒子组成的核酸基因组 DNA 或 RNA，包围一层蛋白质，称为衣壳组成蛋白质亚基或 capsomers。在一些更复杂的病毒衣壳包围其他脂质信封，一些有穗状表面附属物或尾巴。

病毒感染人类和动物的肠道被称为肠道病毒。他们在粪便中排出，可以隔离从生活污水。感染细菌的病毒被称为噬菌体，和那些感染大肠菌群被称为体内大肠杆菌噬菌 (图 1)。噬菌体大肠菌群是任何地方发现大肠菌群发现。

图 1。大肠杆菌 T2。

得到的污水或水中含有大肠杆菌的样本。
稀释的示例 1:10 和 1: 100 用三缓冲区。执行此操作通过将 1.0 毫升的培养液转移到 9 毫升的三缓冲区，然后使第二 10 倍稀释。
通过将它们放在蒸汽浴室或高压釜融化三管的软琼脂（0.7%营养琼脂或胨大豆琼脂每 3 毫升管）。
将琼脂放在水浴在 45-48 ° C 为 15 分钟，使温度的琼脂调整到 45 ° c。
第一筒，添加 1 毫升的大肠杆菌^{1Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here}

污水样品稀释 = 10^-1

获得的斑块数目 = 9

因此，污水样品中的噬菌体浓度
= 10 × 9 ÷ 1 毫升
= 90 空斑形成单位 / 毫升

未经处理的污水通常包含 10³ — — 每毫升，与一系列 10 10⁴大肠杆菌² – 10⁸每毫升。

有许多潜在的应用体内大肠杆菌噬菌作为环境指标。这些包括他们使用作为指标的污水污染，水和废水处理的效率和肠道病毒和细菌在环境中的生存。作为指标的存在和行为的肠道细菌和动物病毒噬菌体的使用一直是有吸引力因为检测的易用性和低成本与噬菌体检测方法。此外，他们可以与天或周为肠道病毒的 24 小时内环境样品中量化。

¹大肠杆菌株 ATCC 15597 通...

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