Name: fabrication of amperometric electrodes
Uploaded: 2009-05-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Amperometric Electrodes at JoVE.com

<p class="jove_content"> Agradecemos al Dr. Aaron P. Fox de la Universidad de Chicago, en cuyo laboratorio este protocolo fue diseñado originalmente, y William Roden (Saint Louis University) para un mayor desarrollo del protocolo. </p><p class="jove_content"> Agradecemos a la Fundación de Whitehall y el National Science Foundation para el apoyo. </p>

<p class="jove_title"> Parte 1: Preparación de fibra de carbono </p><ol><li> Cortar un haz de fibras de carbono (que utilizamos 7μm diámetro) en una longitud que es de ~ 1,25 X la longitud de la pipeta capilar. </li><li> Retire el tamaño de punto de ebullición ~ 100 ml de acetona en un recipiente y añadir las fibras a la acetona caliente, hirviendo durante 30 minutos o más. </li><li> Eliminar las fibras de la acetona caliente, y transferir a un vaso limpio con 50-100 ml de acetona fresca. </li><li> Fibras secas, colocando el paquete en u...

<ol>
	<li>Mundorf, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amperometry+and+cyclic+voltammetry+with+carbon+fiber+microelectrodes+at+single+cells.">Amperometry and cyclic voltammetry with carbon fiber microelectrodes at single cells.</a> <em style='font-style: italic'>Curr Protocols in Neurosci</em>. <b>6</b> (14), 1-6 (2002).</li><li>Machado, D. J., Montesinos, M. S., Borges, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Good+practices+in+single-cell+amperometry.">Good practices in single-cell amperometry.</a> <em style='font-style: italic'>Methods in Molec. Biol</em>. <b>440</b>, 297-313 (2008).</li></ol>

<p class="jove_content"> Este protocolo se describe cómo generar y cortar electrodos amperométricos. En las grabaciones amperométrica, un electrodo de fibra de carbono se coloca contra la superficie de una célula secretora. La actividad de exocitosis se observa como los picos de amperométrica, lo que indica la corriente electroquímica causada por la transferencia de electrones después de la oxidación de las catecolaminas. Con la práctica de decisiones y reducir los electrodos amperométricos, los niveles de ruido puede ser mejorado en ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Epoxy Hardener 1,3-phenylene-diamene flakes</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>P23954-100G04 716AJ</td>
<td>Aliquots are stored in a dessicator and should not be exposed to light.</td>
</tr>
<tr>
<td>Carbon Fibers</td>
<td>Material</td>
<td>Goodfellow</td>
<td>C005725</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro-Hematocrit Capillary Tubes</td>
<td>Material</td>
<td>Fisher</td>
<td>NC9836768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Epoxy Resin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Miller-Stephenson</td>
<td>Epon Resin 828</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting Microscope</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electrode Puller</td>
<td>Instrument</td>
<td>Narishige Japan</td>
<td>PP-830</td>
<td>1st pull = 24.8 degrees C; 2nd pull = 62.7 degrees C</td>
</tr>
<tr>
<td>Oven</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>set to 100 degrees F.</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot plate</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>set to 55 degrees C</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

fabrication of amperometric electrodes

<p class="jove_content">Electrodos de fibra de carbono son cruciales para la detección de la liberación de catecolaminas de las vesículas en las células individuales para las mediciones de amperometría. A continuación, describimos las técnicas necesarias para generar ruido bajos (&lt;0,5 pA) electrodos. Las técnicas han sido modificadas a partir de las descripciones publicadas por otros investigadores (1,2). Los electrodos son hechos por la preparación de fibras de carbono y los hilos de forma individual en cada tubo capilar mediante el uso de una aspiradora con un filtro para aspirar la fibra. A continuación, el tubo capilar con la fibra es tirado por un extractor de electrodos, la creación de dos mitades, cada una con una punta afilada. Los electrodos se sumergen en epoxi líquida caliente mezclada con el endurecedor para crear un sello de epoxy de cristal. Por último, los electrodos se colocan en un horno para curar la resina. El manejo cuidadoso de los electrodos es fundamental para garantizar que se hace de forma coherente y sin daños. Este protocolo se muestra cómo fabricar y cortar electrodos amperométricos para la grabación de una sola célula.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Amperometric Electrodes at JoVE.com

Fabrication of Amperometric Electrodes

<p class="jove_content">Este protocolo se describe cómo generar electrodos de fibra de carbono. Los electrodos se utilizan posteriormente para detectar la liberación de catecolaminas de las vesículas con amperometría de fibra de carbono.</p>

Fabricación de electrodos amperométricos

Carbon fiber electrodes are crucial for the detection of catecholamine release from vesicles in single cells for amperometry measurements.  Here, we ...

Research

JoVE Journal

Biology

Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments

Aplicación de curado con luz Resina Adhesivo Dental para los electrodos de montaje o sondas de microdiálisis en experimentos crónica

In chronic recording experiments, self-curing dental acrylic resins have been used as a mounting base of electrodes or microdialysis-probes. Since these ...

Investigación

Biología

Patterning Cells on Optically Transparent Indium Tin Oxide Electrodes

Las células de patrón indio electrodos ópticamente transparente de óxido de estaño

The ability to exercise precise spatial and temporal control over cell-surface interactions is an important prerequisite to the assembly of multi-cellular ...

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

Fabricación de un dispositivo de microfluidos para la compartimentación de las neuronas y los axones Soma

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

PDMS fabricación de dispositivos y modificación de la superficie

Non-plasma Bonding of PDMS for Inexpensive Fabrication of Microfluidic Devices

No plasmáticos de unión de PDMS para la Fabricación de bajo costo de los dispositivos de microfluidos

In this video, we demonstrate how to use the neuron microfluidic device without plasma bonding.  In some cases it may be desirable to reversibly bond ...

Fabrication of the Thermoplastic Microfluidic Channels

Fabricación de los canales de microfluidos termoplástico

In our lab, we have successfully isolated nucleic acids directly from microliter and submicroliter volumes of human blood, urine and stool using ...

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

Hacer patch pipetas y electrodos de Sharp con un extractor programable

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Micro-drive Array for Chronic <em>in vivo</em> Recording: Drive Fabrication

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication

Micro-array de unidades de crónicos<em> In vivo</em> Grabación: Unidad de Fabricación

Chronic recording of large populations of neurons is a valuable technique for studying the function of neuronal circuits in awake behaving rats. ...

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

Fabricación de construcciones de ingeniería tisular miogénica

Despite the fact that electronic pacemakers are life-saving medical devices, their long-term performance in pediatric patients can be problematic owing to ...

Fabrication and Operation of an Oxygen Insert for Adherent Cellular Cultures 

Fabricación y operación de una inserción de oxígeno para Adherente cultivos celulares

Oxygen is a key modulator of many cellular pathways, but current devices permitting in vitro oxygen modulation fail to meet the needs of biomedical ...