Name: fabrication of amperometric electrodes
Uploaded: 2009-05-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Amperometric Electrodes at JoVE.com

<p class="jove_content"> Vi tackar Dr Aron P. Fox vid University of Chicago, i vars laboratorium detta protokoll ursprungligen konstruerats, och William Roden (Saint Louis University) för vidareutveckling av protokollet. </p><p class="jove_content"> Vi tackar Whitehall Foundation och National Science Foundation för stöd. </p>

<p class="jove_title"> Del 1: kolfiber Förberedelser </p><ol><li> Klipp en bunt av kolfibrer (vi använder 7μm diameter) med en längd som är ~ 1,25 x längden på kapillär pipetten. </li><li> Ta bort storleken bestäms av kokande ~ 100 ml aceton i en behållare och lägga fibrerna för att den varma, kokande aceton i 30 minuter eller längre. </li><li> Ta bort fibrerna från den varma aceton, och överför till en ren bägare med 50-100 ml rent aceton. </li><li> Torra fibrer genom att placera bunten på en öppen 150 mm petriskål och aird...

<ol>
	<li>Mundorf, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amperometry+and+cyclic+voltammetry+with+carbon+fiber+microelectrodes+at+single+cells.">Amperometry and cyclic voltammetry with carbon fiber microelectrodes at single cells.</a> <em style='font-style: italic'>Curr Protocols in Neurosci</em>. <b>6</b> (14), 1-6 (2002).</li><li>Machado, D. J., Montesinos, M. S., Borges, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Good+practices+in+single-cell+amperometry.">Good practices in single-cell amperometry.</a> <em style='font-style: italic'>Methods in Molec. Biol</em>. <b>440</b>, 297-313 (2008).</li></ol>

<p class="jove_content"> Detta protokoll beskriver hur du skapar och skär amperometriska elektroder. Under amperometriska inspelningar, är ett kolfiber elektrod placeras mot ytan av en sekretorisk cell. Exocytotic aktivitet observerats som amperometriska spikar, som anger elektrokemiska nuvarande orsakas av överföringen av elektroner efter oxidering av katekolaminer. Med övning gör och skärning amperometriska elektroder, kan bullernivån vara mycket bättre än många av de kommersiellt tillgängliga elektroderna. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Epoxy Hardener 1,3-phenylene-diamene flakes</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>P23954-100G04 716AJ</td>
<td>Aliquots are stored in a dessicator and should not be exposed to light.</td>
</tr>
<tr>
<td>Carbon Fibers</td>
<td>Material</td>
<td>Goodfellow</td>
<td>C005725</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro-Hematocrit Capillary Tubes</td>
<td>Material</td>
<td>Fisher</td>
<td>NC9836768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Epoxy Resin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Miller-Stephenson</td>
<td>Epon Resin 828</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting Microscope</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electrode Puller</td>
<td>Instrument</td>
<td>Narishige Japan</td>
<td>PP-830</td>
<td>1st pull = 24.8 degrees C; 2nd pull = 62.7 degrees C</td>
</tr>
<tr>
<td>Oven</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>set to 100 degrees F.</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot plate</td>
<td>Instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>set to 55 degrees C</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

fabrication of amperometric electrodes

<p class="jove_content">Kolfiber elektroder är avgörande för detektion av katekolaminer befrielse från blåsor i enstaka celler för amperometry mätningar. Här beskriver vi de tekniker som behövs för att generera låg ljudnivå (&lt;0,5 Pa) elektroder. De tekniker har ändrats från publicerade beskrivningar av tidigare forskare (1,2). Elektroder görs genom att förbereda kolfiber och trä dem individuellt till varje kapillärrör med en dammsugare med ett filter för att aspirera fibern. Därefter är det kapillärröret med fiber som dras av en elektrod avdragare, skapa två halvor, vardera med en fin spets. Elektroderna doppas i hett, flytande epoxi blandat med härdare för att skapa en epoxy-glasförseglingen. Slutligen är de elektroder placeras i en ugn för att bota epoxi. Noggrann hantering av elektroderna är avgörande för att säkerställa att de är konsekvent och utan skador. Detta protokoll visar hur man fabricera och klippa amperometriska elektroder för inspelning från enstaka celler.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Amperometric Electrodes at JoVE.com

Fabrication of Amperometric Electrodes

<p class="jove_content">Detta protokoll beskriver hur du skapar elektroder kolfiber. Elektroderna är sedan används för att upptäcka katekolamin släppa från vesikler med kolfiber amperometry.</p>

Tillverkning av amperometriska elektroder

Carbon fiber electrodes are crucial for the detection of catecholamine release from vesicles in single cells for amperometry measurements.  Here, we ...

Research

JoVE Journal

Biology

Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments

Tillämpning av Ljus cured Dental Lim Resin för montering Elektroder eller sonder Mikrodialys vid kronisk Experiment

In chronic recording experiments, self-curing dental acrylic resins have been used as a mounting base of electrodes or microdialysis-probes. Since these ...

Patterning Cells on Optically Transparent Indium Tin Oxide Electrodes

Mönstring på Celler på optiskt transparent Oxide Indium Tin Elektroder

The ability to exercise precise spatial and temporal control over cell-surface interactions is an important prerequisite to the assembly of multi-cellular ...

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

Tillverkning av en mikroflödessystem enhet för uppdelning av Neuron Soma och Axoner

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

PDMS Komponentframställning och ytmodifiering

Non-plasma Bonding of PDMS for Inexpensive Fabrication of Microfluidic Devices

Icke-plasma Limning av PDMS för billig Tillverkning av mikroflödessystem enheter

In this video, we demonstrate how to use the neuron microfluidic device without plasma bonding.  In some cases it may be desirable to reversibly bond ...

Fabrication of the Thermoplastic Microfluidic Channels

Tillverkning av termoplast mikroflödessystem kanaler

In our lab, we have successfully isolated nucleic acids directly from microliter and submicroliter volumes of human blood, urine and stool using ...

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

Göra Patch-pipetter och Sharp Elektroder med en programmerbar Puller

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

Tillverkning av Myogenic vävnadstekniska Konstruerar

Despite the fact that electronic pacemakers are life-saving medical devices, their long-term performance in pediatric patients can be problematic owing to ...

Fabrication and Operation of an Oxygen Insert for Adherent Cellular Cultures 

Tillverkning och drift av en Oxygen Insats för Vidhäftande cellodlingar

Oxygen is a key modulator of many cellular pathways, but current devices permitting in vitro oxygen modulation fail to meet the needs of biomedical ...

Fabrication and Use of MicroEnvironment microArrays (MEArrays)

Fabrication and Use of MicroEnvironment microArrays MEArrays

Tillverkning och användning av mikromiljö microarrays (MEArrays)

The interactions between cells and their surrounding microenvironment have functional consequences for cellular behaviour. On the single cell level, ...