资料来源： 穆尼尔·西尔万^1，2，3，佩尔切特·蒂鲍特^1，2，3，苏菲·诺沃^4，雷切尔·戈卢布^1，2，3
1法国巴黎巴斯德研究所免疫学系淋巴病系
² INSERM U1223， 巴黎， 法国
³巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国
⁴流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎

预防病原体取决于免疫系统的监测。该系统很复杂，包括许多细胞类型，每种类型都有特定的功能。这种复杂的组成能够对大量病原体和损伤进行免疫反应。适应性免疫允许对特定病原体作出特定反应。负责这种免疫的大多数细胞是淋巴细胞（B细胞和T细胞）。通常，B细胞对细胞外感染（如细菌感染）作出反应，T细胞对细胞内感染（如病毒感染）作出反应。淋巴细胞群中不同类型的细胞可以通过它们表达的细胞表面蛋白和/或分泌细胞因子的面板的组合来表示。

磁性分选允许使用磁性特性和一个或多个细胞表面蛋白的表达来丰富目标细胞群（1，2）。此技术包括三个步骤。首先，细胞用磁珠孵育，磁珠与一个或多个单克隆特异性抗体结合。表达与这些抗体结合的表面蛋白的细胞附着在磁珠上。然后，用磁铁捕获目标细胞群。最后，目标细胞从磁铁中洗脱。最后，获得两个分拣产品，一个包含未标记的细胞，第二个包含与磁珠结合的目标细胞。列可用于提高磁分拣效率。在列中，非磁性元素延长细胞穿过列的路径。因此，细胞流减慢，促进细胞捕获的磁铁。

图1：磁分离的原理表示。双核白细胞被染色的抗CD3生物素化抗体。洗涤后，链球菌（SAV）耦合珠子在抗CD3抗体上专门固定生物链。（1） 单元格在列中传输。（2） 磁体不保留未标记的细胞，而CD3阳性细胞则保留在柱中。最后，将柱与磁体分离，（3）CD3阳性细胞在介质中洗脱。请点击此处查看此图的较大版本。

有两种类型的磁性分拣 （3）。在正排序中，感兴趣的细胞被磁珠捕获。在负排序中，通过捕获携带相应抗体的磁珠来去除不需要的细胞。这种MACS技术允许目标细胞的良好富集，并将器官中回收的细胞的百分比从1-20%提高到60-98%。分拣后，有必要用不同的方法（例如流式细胞测定）验证细胞纯度和分拣。MACS 技术是丰富目标人群的理想，用于其他实验，如细胞培养或细胞周期分析。

在本实验练习中，我们演示如何分离胸腺白细胞，然后使用磁细胞分选技术从混合物中丰富胸腺CD3阳性细胞。