资料来源：佩尔切特·蒂鲍特^1，2，3，穆尼尔·西尔万^1，2，3，苏菲·诺沃^4，雷切尔·戈卢布^1，2，3
1淋巴病系，法国巴黎巴斯德研究所免疫学系
² INSERM U1223， 巴黎， 法国
³巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国
⁴流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎

细胞周期是一个普遍的生命过程。在细胞周期中，细胞经历几次修改，以分成两个子细胞。这种机制发生在生物体的整个生命中，以响应其需求。细胞分裂和胚胎发育从单细胞酶中产生完整的生物体。在成年期间，细胞周期是许多关键生物过程的核心，如组织修复。

细胞分裂机制是严格控制的事件，细胞在最终分裂前进行逐步修改。尚未处于循环中的细胞被描述为处于 Gap 0 （G₀） 阶段。在此阶段，细胞被认为是静止的。当细胞开始循环时，四个不同的相位被识别：_{间隙1（G1），}合成（S），间隙2（G2）和米托西斯（M）。G₁相是细胞DNA合成所需资源的检查点。然后，S 相发生，DNA 复制开始，然后是_G2相间，另一个检查点控制细胞分裂所需的所有元素。最后，细胞进入米细胞，并分裂成两个子细胞。

细胞分裂是许多不同生物系统中信息丰富的参数。在免疫学领域，白细胞增殖分析可以说明免疫反应机制。其他调查领域也依赖于细胞周期分析。例如，对肿瘤发育过程中的细胞周期的分析提高了我们对癌症的理解。

许多荧光染料现在可用于跟踪细胞增殖。这些染料的化学和光谱特性不同。存在两种不同类别的染料：蛋白质染料通过形成共价键与蛋白质永久结合，膜染料通过强疏水性关联在细胞膜内均匀地穿插。通过流动细胞学对免疫细胞增殖进行体外和体内研究是这两类细胞跟踪染料（1，2）最常见的应用之一。

CFSE（卡博司氟辛琥珀基酯）是一种荧光染料，标志着分裂细胞。最初，所有细胞都接收相同数量的染料;将细胞均匀地分割他们收到的染料，在它们的两个子细胞之间。因此，细胞周期之后，细胞中的染料强度会逐渐降低。CFSE 染色之后是传统的多参数流式细胞测定法，这是一种高通量、基于荧光的技术，允许根据细胞的CFSE染色程度对细胞进行表型和功能表征（3）。

在下面的实验中，我们使用CFSE染色和流式细胞测定法，在CD3刺激后，评估CD4+和CD8+T细胞在体外增殖。