העברת תאים מאמצת: הצגת טחול עכבר תורם לעכבר מארח והערכה של הצלחה באמצעות FACS

מקור: מוניר^{סילבן 1,2,3}, פרצ'ט^{תיבו 1,2,3}, סופי^{נובולט 4}, רחל גולוב^{1,2,3
יחידה אחת} ללימפופוליס, המחלקה לאימונולוגיה, מכון פסטר, פריז, צרפת
² INSERM U1223, פריז, צרפת
³ 100é Paris Diderot, סורבון פריז סיטה, צ'רול פסטר, פריז, צרפת
^{4 פלטפרום} ציטומטריה זרימה, ציטומטריה וסמנים ביולוגיים UtechS, המרכז למדע תרגום, מכון פסטר, פריז, צרפת

העברת תאים מאמצת היא שיטה להכנסת תאים לחולה או לאורגניזם מחקרי על מנת לטפל במחלה או ללמוד תהליך ביולוגי, כגון המטופיס. מטרות ההעברה המאמצת שונות; זה יכול לשמש בביולוגיה בסיסית, כמו גם במדעי הרפואה (1, 2). במודלים של עכבר, העברה והפצה של תאים שהועברו ניתן ללמוד ואחריו מערכת מעקב (סמן משטח תא, כתמים על ידי CFSE, וכו '). במחקרי סרטן על מודלים עכבר, העברה של אוכלוסיות תאים ספציפיות יכולה לשמש כטיפול ניסיוני נגד גידולים. דוגמה נוספת לטכניקה זו היא יצירת עכברים כימריים על ידי העברת תאי מח עצם לעכברים או עכברים מוקרן עם פנוטיפ חיסוני חמור. מודל עכבר זה יכול לשמש כדי להעריך את ההשפעה של מחיקת גנים על אוכלוסיית תאים ספציפית למשל. העברת תאי השאלת עצם משמשת גם בטיפול רפואי אנושי. כאשר חולים מוקרנים במקרה של טיפול בסרטן, העברה מאמצת של מח עצם מאפשרת שחזור מערכת החיסון.

הצעד הראשון בטכניקה זו הוא להשיג את אוכלוסיית התאים של עניין. הטכניקה שנבחרה לבודד אוכלוסייה זו תלויה ברמת הספציפיות של האוכלוסייה הממוקדת. רמת הבחירה הגדולה ביותר היא האיבר כולו, שבו נלקחות כל אוכלוסיות התאים הקיימות באיבר. שיטה מדויקת יותר היא בחירה של אוכלוסיית תאי יעד, שנבחרה לעתים קרובות על-ידי סמן משטח תא אחד. השיטה האידיאלית למיין תאים במקרה זה היא על ידי מיון מגנטי. לבסוף, הרמה המחמירה ביותר היא בחירת התאים על ידי מספר סמני פני השטח של התא כדי למיין אוכלוסיות תאים ספציפיות מאוד. מיון ציטומטריית זרימה היא השיטה הפופולרית ביותר עבור רמה זו של בחירה. לאחר קבלת אוכלוסיית העניין, ניתן להעביר אותה למארח. לפני העברה מאמצת זה חיוני כדי להבטיח תאימות בין המארח לתורם. ואכן, ללא קשר למטרת ההעברה, התאימות חיונית כדי להבטיח אימוץ תאים על ידי המארח ללא דחיית תאים.

בתרגיל מעבדה זה, אנו מדגימים את טכניקת העברת התאים המאמצת על ידי העברת טחול מעכבר CD45.2 לעכבר CD45.1 Ragγc (חסר לימפוציטים) וארבעה ימים לאחר מכן מאשרים את העברת הטחול באמצעות ציטומטריית זרימה (ראה איור 1).

איור 1: ייצוג סכמטי של העברה מאמצת. (1) ספלוציטים מבודדים מעכברי CD45.2 ו- (2) מועברים בעכבר CD45.1 Ragγc, עכבר בקרה מוזרק ל- PBS בלבד. (3) 4 ימים לאחר העברה מאמצת, טחול הם התאוששו מעכברים ו (4) מנותח על ידי cytometry זרימה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.