입양 세포 전송: 기증자 쥐 비장 세포를 숙주 쥐에 도입 후 FACS를 통한 성공 평가

출처: 뮤니에 실베인^1,2,3,퍼셰 티보^1,2,3,소피 노볼트^4,레이첼 골럽^1,2,3
1 림프포포에이시스, 면역학학과, 파스퇴르 연구소, 파리, 프랑스
² INSERM U1223, 파리, 프랑스
³ 유니버시테 파리 디드로, 소르본 파리 시테, 셀룰레 파스퇴르, 파리, 프랑스
⁴ 흐름 세포측정플리트에서, 세포측정및 바이오마커 UtechS, 번역 과학 센터, 파스퇴르 연구소, 파리, 프랑스

입양 세포 전달은 질병을 치료하거나 혈액 마비증과 같은 생물학적 과정을 연구하기 위해 환자 또는 연구 유기체로 세포를 도입하는 방법입니다. 입양 전송의 목적은 다양합니다. 그것은 기본 생물학뿐만 아니라 의학에서 사용할 수 있습니다 (1, 2). 마우스 모델에서, 전송된 세포의 이동 및 분포는 추적 시스템(세포 표면 마커, CFSE에 의한 염색 등)에 의해 연구되고 그 다음에 선행될 수 있다. 마우스 모형에 암 연구 결과에서는, 특정 세포 인구의 전송은 종양에 대하여 실험적인 처리로 이용될 수 있습니다. 이 기술에 대한 또 다른 예는 심한 면역 결핍 표현형을 가진 조사 마우스 또는 마우스에 골수 세포의 전송에 의해 키메라 마우스의 생성이다. 이 마우스 모형은 예를 들면 특정 세포 인구에 유전자 삭제의 충격을 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 뼈 차용 세포의 전송은 또한 인간의 치료에 사용됩니다. 환자가 암 치료의 경우에 조사될 때, 골수의 입양 전송은 면역 계통 재구성을 허용합니다.

이 기술의 첫 번째 단계는 관심의 세포 인구를 얻는 것입니다. 이 인구를 격리하기 위해 선택한 기술은 대상 인구의 특이성 수준에 따라 달라집니다. 선택의 가장 큰 수준은 장기에 존재하는 모든 세포 집단이 취해지는 전체 기관입니다. 보다 정밀한 방법은 표적 세포 집단의 선택이며, 종종 하나의 세포 표면 마커에 의해 선택된다. 이 경우 셀을 정렬하는 이상적인 방법은 자기 정렬입니다. 마지막으로, 가장 엄격한 수준은 매우 특정 세포 집단을 정렬하는 여러 세포 표면 마커에 의해 세포의 선택입니다. 흐름 세포 분석 정렬은 이 선택 수준에 가장 인기 있는 방법입니다. 관심 의 인구가 얻어지면 호스트로 전송 할 수 있습니다. 입양 전송 전에 호스트와 기증자 사이의 호환성을 보장하는 것이 필수적입니다. 실제로, 전송 목표에 관계없이 호환성은 세포 거부없이 호스트에 의해 세포 채택을 보장하기 위해 중요합니다.

본 실습에서, CD45.2 마우스에서 비장세포를 CD45.1 Ragγc 마우스(림프구 부족)로 이송하여 채택세포 전달 기술을 입증하고 4일 후 유동 세포측정법을 사용하여 비장세포 전달을 확인한다(그림 1참조).

그림 1: 입양 전송의 회로도 표현. (1) 비장세포는 CD45.2 마우스로부터 분리되고 (2) CD45.1 Ragγc 마우스로 전송되며, 제어 마우스는 PBS만으로 주입된다. (3) 입양 전달 후 4일, 비장세포는 마우스로부터 회수되고 (4) 혈류 세포측정에 의해 분석된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.