Name: horizontal slice preparation of the retina
Uploaded: 2006-11-20T00:00:00
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<p> Agradecemos a drs. Richard H. Masland e Akimichi Kaneko por nos dar conselhos e sugestões valiosas para estabelecer o procedimento da preparação fatia horizontal da retina. </p>

<ol><li> Prepare um bloco de agar (30 mg / ml, ou seja 3%, em água destilada). Dissolver e microondas-lo primeiro e coloque em uma travessa de vidro. Mantenha o prato no frigorífico a 4 <sup>º</sup> C. <br /> <em>Dica: O bloco de ágar deve ser preparado com antecedência. <br /></em> <br /></li><li> Prepare baixa temperatura de fusão-agarose gel (25 mg / ml, ou seja, 2,5%, em média). Dissolver e microondas. Mantê-lo no banho de água quente a 35 <sup>o</sup> C. <br /> <em>Dica: Mantenha o gel agarose não muito quente. Se for muito quent...

<ol>
	<li>Azuma, T., Enoki, R., Iwamuro, K., Kaneko, A., Koizumi, A., Koizumi, A., TC, J. a. k. o. b. s., Masland, R. H., MA, M. a. c. N. e. i. l., RH, M. a. s. l. a. n. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+spatiotemporal+patterns+of+dendritic+Ca2++signals+in+goldfish+retinal+amacrine+cells.">Multiple spatiotemporal patterns of dendritic Ca2+ signals in goldfish retinal amacrine cells.</a> <em style='font-style: italic'>Brain Res</em>. , 64-73 (2004).</li></ol>

<p> Existem várias vantagens importantes da preparação fatia horizontal da retina. </p><p> Primeiro, a morfologia das células que se expandem horizontalmente dendrites, como as células amácrinas e células horizontal, é preservada. Tem sido demonstrado que há mais de 20 tipos de células amácrinas na retina (MacNeil e Masland, 1998), de modo que é muito importante para comparar a morfologia das células com a propriedade fisiológica. </p><p> Em segundo lugar, em toda a retina de montagem, a extensa cobertura do endfeets células glia...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-1296</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Agarose L</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Wako</td>
<td>317-01182</td>
<td>Low-temperature melting agarose </td>
</tr>
<tr>
<td>Hyaluronidase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Type I-S, 300 units/mg</td>
</tr>
<tr>
<td>Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>in mM: 102 NaCl, 3.1 KCl, 2.0 CaCl2, 1.0 MgCl2, 23 NaHCO3, and 10 glucose, maintained at pH 7.8, or, Ames&#x2019; Solution (Sigma)</td>
</tr>
<tr>
<td>Microwave</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hot water bath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>35 C</td>
</tr>
<tr>
<td>Vibratome slicer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica</td>
<td>VT1000S</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MF-Membrane filters</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>HAWP01300</td>
<td>Filter paper , pore size 0.45 um</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissection tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>forceps, blade, pinch, twizzer, etc.</td>
</tr>
<tr>
<td>Instant glue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>eg., Alonalpha, Krazy Glu</td>
</tr>
<tr>
<td>50 ml syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>syringe filter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>SX0001300</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

horizontal slice preparation of the retina

<p class="jove_content">Tradicionalmente a fatia vertical e toda a preparação para montagem da retina têm sido usados ​​para estudar a função dos circuitos da retina. No entanto, muitos dos neurônios da retina, tais como as células amácrinas, expandir as suas dendrites horizontalmente, de modo que a morfologia das células é suposto ser severamente danificado nas fatias verticais. Em toda a preparação de montagem, especialmente para patch-clamp gravações, os neurônios da retina na camada do meio não são facilmente acessíveis devido à extensa cobertura de células gliais endfeets (célula Mueller) s. Aqui, descrevemos a novela corte método para preservar a morfologia dendrítica de neurônios da retina intacta. A fatia foi feito horizontalmente na camada interna da retina usando um cortador de vibratome após a retina foi incorporado na baixa temperatura de fusão agarose gel. Nessa preparação fatia horizontal da retina, estudamos a função dos neurônios da retina comparado com sua morfologia, usando patch-clamp gravação, técnica de imageamento de cálcio, imunocitoquímica, e de uma única célula RT-PCR.</p>

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Horizontal Slice Preparation of the Retina

<p class="jove_content">Tradicionalmente a fatia vertical e toda a preparação para montagem da retina têm sido usados ​​para estudar a função dos circuitos da retina. Aqui, descrevemos a novela corte método para preservar a morfologia dendrítica de neurônios da retina intacta.</p>

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