Name: es cell-derived neuroepithelial cell cultures
Uploaded: 2006-11-30T00:00:00
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चरण 1 <ol><li> Mitomycin सी प्लेट (10 / 2.5 घंटे के लिए μg मिलीलीटर) ggrowth जिलेटिन लेपित (30 मिनट के लिए 0.01%) α सदस्य मीडिया में 6 अच्छी तरह प्लेटें पर 70,000 / cm2 के घनत्व पर MS5 कोशिकाओं हिचकते. </li><li> जब कोशिकाओं को संलग्न कर रहे हैं और एक monolay...

<ol>
	<li>Kawasaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+midbrain+dopaminergic+neurons+from+ES+cells+by+stromal+cell-derived+inducing+activity.">Induction of midbrain dopaminergic neurons from ES cells by stromal cell-derived inducing activity.</a> Neuron. 28, 31-40 (2000).</li><li>Perrier, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+midbrain+dopamine+neurons+from+human+embryonic+stem+cells.">Derivation of midbrain dopamine neurons from human embryonic stem cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 12543-12548 (2004).</li><li>Pruszak, J., Isacson, O., Sullivan, S., Cowan, C., Eggan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+into+dopaminergic+neurons.">Directed differentiation of human embryonic stem cells into dopaminergic neurons.</a> Human Embryonic Stem Cells: The Practical Handbook. , (2007).</li><li>Pruszak, J., Sonntag, K. C., Aung, M. H., Sanchez-Pernaute, R., Isacson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Markers+and+methods+for+cell+sorting+of+human+embryonic+stem+cell-derived+neural+cell+populations.">Markers and methods for cell sorting of human embryonic stem cell-derived neural cell populations.</a> Stem Cells. 25, 2257-2268 (2007).</li><li>Sonntag, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+yield+of+neuroepithelial+precursors+and+midbrain-like+dopaminergic+neurons+from+human+embryonic+stem+cells+using+the+bone+morphogenic+protein+antagonist+noggin.">Enhanced yield of neuroepithelial precursors and midbrain-like dopaminergic neurons from human embryonic stem cells using the bone morphogenic protein antagonist noggin.</a> Stem Cells. 25, 411-418 (2007).</li><li>Kawasaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+dopaminergic+neurons+and+pigmented+epithelia+from+primate+ES+cells+by+stromal+cell-derived+inducing+activity.">Generation of dopaminergic neurons and pigmented epithelia from primate ES cells by stromal cell-derived inducing activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 1580-1585 (2002).</li><li>Ko, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+neural+precursors+as+a+continuous,+stable,+and+on-demand+source+for+human+dopamine+neurons.">Human embryonic stem cell-derived neural precursors as a continuous, stable, and on-demand source for human dopamine neurons.</a> J Neurochem. 103, 1417-1429 (2007).</li><li>Hong, S., Kang, U. J., Isacson, O., Kim, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+precursors+derived+from+human+embryonic+stem+cells+maintain+long-term+proliferation+without+losing+the+potential+to+differentiate+into+all+three+neural+lineages,+including+dopaminergic+neurons.">Neural precursors derived from human embryonic stem cells maintain long-term proliferation without losing the potential to differentiate into all three neural lineages, including dopaminergic neurons.</a> J Neurochem. , (2007).</li><li>Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+subtype+specification+from+embryonic+stem+cells.">Neural subtype specification from embryonic stem cells.</a> Brain Pathol. 16, 132-142 (2006).</li><li>Pankratz, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+neural+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+via+an+obligated+primitive+anterior+stage.">Directed neural differentiation of human embryonic stem cells via an obligated primitive anterior stage.</a> Stem Cells. 25, 1511-1520 (2007).</li><li>Lazzari, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+derivation+of+neural+rosettes+from+cloned+bovine+blastocysts:+a+model+of+early+neurulation+events+and+neural+crest+specification+in+vitro.">Direct derivation of neural rosettes from cloned bovine blastocysts: a model of early neurulation events and neural crest specification in vitro.</a> Stem Cells. 24, 2514-2521 (2006).</li><li>Pomp, O., Brokhman, I., Ben-Dor, I., Reubinoff, B., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+peripheral+sensory+and+sympathetic+neurons+and+neural+crest+cells+from+human+embryonic+stem+cells.">Generation of peripheral sensory and sympathetic neurons and neural crest cells from human embryonic stem cells.</a> Stem Cells. 23, 923-930 (2005).</li></ol>

इस प्रोटोकॉल पैदा करने और मानव ES SDIA का उपयोग कोशिकाओं से neuroepithelial कोशिकाओं में अलग अलग चरणों को दर्शाता है. इस विधि का आवेदन कई गुना है और कई प्रोटोकॉल में इस्तेमाल किया गया है निर्दिष्ट न्यूरॉन्स का उत्पादन (1 उदाह?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>L-glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>25030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>alpha-MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>12571</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>penicillin/streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout-DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>10829</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout serum replacement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>10828</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM non-essential amino acid solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>12383</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM/F12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>11330</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N2-A supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stem Cell Technologies</td>
<td>07152</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>mitomycin-C</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M0503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>gelatine type-A</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1890</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>poly-L-ornithine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4957</td>
<td>0.01 % solution </td>
</tr>
<tr>
<td>laminin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>L-2020</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>fibronectin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>F2006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>basic fibroblast growth factor (bFGF)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1 ml syringe with 27 1/2 G needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton Dickinson</td>
<td>309623</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N2-A media</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>DMEM/F12 + 1% N2-A supplement </td>
</tr>
<tr>
<td>Serum replacement media (SRM)</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Knockout-DMEM + 20 % Knockout serum replacement +1% MEM non-essential amino acid solution + 2 mM L-glutamine</td>
</tr>
<tr>
<td>&#x03B1;-MEM media</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&#x03B1;-MEM + 10 % FBS + 2 mM L-glutamine + 1%penicillin/streptomycin</td>
</tr>
<tr>
<td>MS5</td>
<td>cell line</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>stromal cells </td>
</tr>
<tr>
<td>Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6 well plates</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>for tissue culture</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>

es cell-derived neuroepithelial cell cultures

ES कोशिकाओं सभी रोगाणु परतें, जो उन्हें नए उपचारों के विकास के लिए एक आकर्षक उपकरण बनाती से कोशिकाओं में अंतर करने की क्षमता है. सामान्य में, ES कोशिकाओं की भेदभाव की अवधारणा का अनुसरण करने के लिए पहली बार अपरिपक्व पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं, जो तब और प्रचारित किया जा सकता है परिपक्व सेलुलर phenotypes में भेदभाव उत्पन्न. यह भी ES neurogenesis सेल व्युत्पन्न के लिए लागू होता है, तंत्रिका कोशिकाओं के विकास में जो दो प्रमुख चरणों में निम्न प्रकार है: पहले, व्युत्पत्ति और परिपक्व तंत्रिका कोशिकाओं में विस्तार अपरिपक्व neuroepithelial व्यापारियों और दूसरे, उनके भेदभाव के. एक सामान्य विधि ES कोशिकाओं से तंत्रिका progenitors उत्पादन embryoid शरीर (EB) के गठन, जो neuroectoderm सहित सभी रोगाणु परतें से कोशिकाओं की भिन्नता से पता चलता है पर आधारित है. Neuroepithelial सेल के विकास को प्रेरित करने के लिए एक वैकल्पिक और अधिक कुशल पद्धति stromal उत्प्रेरण सेल व्युत्पन्न (SDIA) गतिविधि है, जो सह संवर्धन खोपड़ी की हड्डी मज्जा stromal कोशिकाओं व्युत्पन्न (1) के साथ ES कोशिकाओं के द्वारा प्राप्त किया जा सकता का उपयोग करता है. दोनों EB गठन और SDIA, थाली की तरह संरचनाओं के विकास, ट्यूब और जो तंत्रिका सदृश करने के लिए लगा रहे हैं / या तंत्रिका शिखा की तरह progenitors प्रकट करते हैं. तंत्रिका व्यापारियों, अलग किया जा सकता है विस्तार और विशिष्ट न्यूरॉन्स और glia कोशिकाओं परिभाषित संस्कृति शर्तों का उपयोग करने में आगे विभेदित. यहाँ, हम पीढ़ी और stromal सेल MS5 लाइन (2-5) के साथ सह संस्कृति प्रयोगों में ऐसे rosettes के अलगाव का वर्णन.

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ES Cell-derived Neuroepithelial Cell Cultures

भ्रूण स्टेम (ते) stromal उत्प्रेरण सेल व्युत्पन्न गतिविधि (SDIA) का उपयोग कोशिकाओं से neuroepithelial व्यापारियों की व्युत्पत्ति.

ES सेल व्युत्पन्न Neuroepithelial सेल संस्कृतियों

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