Name: batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain
Uploaded: 2009-07-27T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ونحن ممتنون لارفين فرانك ، Palmour روبرتا وموظفي مختبرات العلوم السلوكية مؤسسة تقع في سانت كيتس وجزر الهند الغربية ، على دعمهم المستمر لعملنا الرئيسيات. وأيد هذا العمل من خلال منحة من مؤسسة البحوث الهشة العاشر من كندا (FXRFC) لSZ و-- المنح التي تعمل من المعاهد الكندية للأبحاث الصحية (ميلان) والهندسة ومجلس البحوث الوطني في كندا (MP). </p>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> Immunohistochemisty هي واحدة من أكثر التقنيات المستخدمة على نطاق واسع لوصف تعبير البروتين في الدماغ لمختلف النماذج الحيوانية التجريبية. فمن السهل نسبيا لإجراء إجراءات منهجية المناعى على أدمغة الفئران وغيرها من نماذج تجريبية مشتركة مع حجم المخ مماثلة. ومع ذلك ، لا يوجد عمل نش...

<ol>
	<li>Olfert, E. D., Cross, B. M., McWilliam, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Guide to the Care and Use of Experimental Animals</em>. , (1993).</li><li>Devys, D., Lutz, Y., Rouyer, N., Bellocq, J. P., Mandel, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+FMR-1+protein+is+cytoplasmic,+most+abundant+in+neurons+and+appears+normal+in+carriers+of+a+fragile+X+premutation.">The FMR-1 protein is cytoplasmic, most abundant in neurons and appears normal in carriers of a fragile X premutation.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Genet</em>. <b>4</b>, 335-340 (1993).</li><li>Mullen, R. J., Buck, C. R., Smith, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NeuN,+a+neuronal+specific+nuclear+protein+in+vertebrates.">NeuN, a neuronal specific nuclear protein in vertebrates.</a> <em style='font-style: italic'>Development</em>. <b>116</b>, 201-211 (1992).</li><li>Sternberger, L. A., Sternberger, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+distinguish+phosphorylated+and+nonphosphorylated+forms+of+neurofilaments+in+situ.">Monoclonal antibodies distinguish phosphorylated and nonphosphorylated forms of neurofilaments in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>80</b>, 6126-6130 (1983).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> هناك نوعان من الخطوات الحاسمة في هذا الإجراء التي تجعل نطاق واسع الكشف عن البروتينات في الدماغ بأكمله قرد ممكن. واحد هو بروتوكول التضمين وsectioning ، التي لا تزال المعرفة الشخصية من وكالة الامن القومي. والآخر هو استخدام الأطباق والسلال تلطيخ HistoTools التي تقدمها. هذا الأخي?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>anti-FMRP monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Chemicon</td>
<td>MAB2160</td>
<td>Requires antigen retrieval in fixed tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>anti-NeuN monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Chemicon</td>
<td>MAB377</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>anti-Neurofilament H monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sternberger Monoclonals Inc.</td>
<td>SMI32</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>Antigen Unmasking Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-3300</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>Normal horse serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>16050122</td>
<td>500 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Biotinylated Anti-Mouse IgG (H+L), made in horse</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>BA-2000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>VECTASTAIN ABC Kit (Standard)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>PK-4000</td>
<td>1.5 mg</td>
</tr>
<tr>
<td>Staining dish for floating sections</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HistoTools</td>
<td>10009</td>
<td>12 x 65 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Staining transport basket</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HistoTools</td>
<td>10012</td>
<td>large<br />
(fits 12 x 65 mm dish)</td>
</tr>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>P8514B</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>DAB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>AC11209-0050</td>
<td>N/A</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain

<p class="jove_content">المناعية (IHC) هي واحدة من التقنيات المستخدمة على نطاق واسع مختبر للكشف عن البروتينات المستهدفة<em&gt; في الموقع</em&gt;. أسئلة تتعلق نمط التعبير عن بروتين هدف عبر الدماغ بأكمله من السهل نسبيا للرد عند استخدام IHC في العقول الصغيرة ، مثل تلك التي من القوارض. ومع ذلك ، في الإجابة على الأسئلة نفسها في أدمغة كبيرة ومعقدة ، مثل تلك التي من قرود يقدم عددا من التحديات. هنا نقدم مقاربة منهجية للمناعي للبروتينات المستهدفة في المخ قرد الكبار. هذا النهج يعتمد على الأنسجة والتضمين sectioning منهجية المنتسبين علم الأعصاب (NSA) ، وكذلك الأدوات التي تم تطويرها خصيصا للتلوين ، دفعة من التعويم الحر المقاطع. انها نتيجة في تلوين موحدة لمجموعة من الفروع التي في فاصل زمني معين ، ويمثل الدماغ كله. يمكن أن يتعرض المقاطع الناتجة الملون لطائفة واسعة من الإجراءات التحليلية لقياس مستويات البروتين ، والسكان من الخلايا العصبية التي تعبر عن بروتين معين.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain at JoVE.com

Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain

<p class="jove_content">على نطاق واسع مناعي للبروتينات المستهدفة في جميع أنحاء الدماغ الرئيسيات كله هو ممكن من خلال استخدام نسيج الرواية أساليب التضمين وsectioning جنبا إلى جنب مع استخدام أجهزة مبتكرة لتلوين مجموعة من المقاطع التعويم الحر متعددة في وقت معين.</p>

Immunostaining دفعي للكشف عن البروتين واسعة النطاق في الدماغ القرد الجامعة

Immunohistochemistry (IHC) is one of the most widely used laboratory techniques for the detection of target proteins in situ. Questions concerning the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Large-Scale Screens of Metagenomic Libraries

على نطاق واسع من شاشات مكتبات Metagenomic

Metagenomic libraries archive large fragments of contiguous genomic sequences from microorganisms without requiring prior cultivation.  Generating a ...

Detection of Protein Ubiquitination

اكتشاف بروتين Ubiquitination

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Purification of the <em>M. magneticum</em> Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&Delta;41

تنقية<em> م. magneticum</em> سلالة AMB - 1 بروتين المرتبطين Magnetosome MamAΔ41

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is ...

Large Scale Zebrafish-Based <em>In vivo</em> Small Molecule Screen

Large Scale Zebrafish-Based In vivo Small Molecule Screen

اسماك الزرد نطاق واسع ، واستنادا<em> في الجسم الحي</em> شاشة جزيء صغير

Given their small embryo size, rapid development, transparency, fecundity, and numerous molecular, morphological and physiological similarities to ...

Infinium Assay for Large-scale SNP Genotyping Applications

Infinium الفحص على نطاق واسع لتطبيقات SNP التنميط الجيني

Genotyping variants in the human genome has proven to be an efficient method to identify genetic associations with phenotypes. The distribution of ...

A Strategy for Sensitive, Large Scale Quantitative Metabolomics

استراتيجية للحساسية، مقياس كبيرة الكمية الايض

Metabolite profiling has been a valuable asset in the study of metabolism in health and disease. However, current platforms have different limiting ...

Investigating Protein-protein Interactions in Live Cells Using Bioluminescence Resonance Energy Transfer

التحقيق البروتين البروتين التفاعلات في الخلايا الحية باستخدام الرنين ضوء بارد نقل الطاقة

Assays based on Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) provide a sensitive and reliable means to monitor protein-protein interactions in live ...

ODELAY: A Large-scale Method for Multi-parameter Quantification of Yeast Growth

أوديلاي: طريقة على نطاق واسع لالمعلمات المتعددة الكمي للنمو الخميرة

Growth phenotypes of microorganisms are a strong indicator of their underlying genetic fitness and can be segregated into 3 growth regimes: lag-phase, ...

Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in <em>Helianthus Annuus</em>

Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus

تحديد المنظمين رواية نتح النبات من خلال فحص التصوير الحراري على نطاق واسع في <em>Helianthus Annuus</em>

Plant adaptation to biotic and abiotic stresses is governed by a variety of factors, among which the regulation of stomatal aperture in response to water ...

Immunostaining of Whole-Mount <em>Drosophila</em> Testes for 3D Confocal Analysis of Large Spermatocytes

Immunostaining of Whole-Mount Drosophila Testes for 3D Confocal Analysis of Large Spermatocytes

الالتصنت المناعي من الخصيتين <em>Drosophila</em> جبل كله لتحليل Confocal 3D من الحيوانات المنوية الكبيرة

Drosophila testes are a powerful model system for studying biological processes including stem cell biology, nuclear architecture, meiosis and sperm ...