Name: staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid
Uploaded: 2009-08-14T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ברצוננו להודות סיוע טכני של אינס Racké. </p>

<p class="jove_title" style=";text-align:right;direction:rtl"> חלק 1: הכנת התמיסה מכתים CBB </p><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 60-80 מ&quot;ג CBB G-250 הם מומס 1 ליטר מים bidistilled על ידי ערבוב במשך 2-4 שעות. לבסוף, 3 מ&quot;ל של HCl מרוכזת מתווסף הפתרון כחול כהה עם ערבוב עוד דקה ומאוחסנים בחושך לשימוש מאוחר יותר. הפתרון יכול להיות מאוחסן ?...

<ol>
	<li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+for+fast+visualization+of+protein.">Process for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li><li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+for+fast+visualization+of+protein.">Solution for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li></ol>

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השלבים כביסה הם קריטיים עבור מכתים יעיל של חלבונים. זמן כביסה מופחת מתחת 2 דקות או נפח מופחתת של מים (&lt;50 מ&quot;ל) עלולה לגרום חיוור להקות חלבון כחול, ככל הנראה בשל כמויות גדולות יותר של SDS שאריות הג&#39;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם החלבונים הם הולכים להיות ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AppliChem</td>
<td>A3480</td>
<td>any other CBB G-250 could be used as well</td>
</tr>
<tr>
<td>Concentrated HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid

<p class="jove_content">בשנת קלאסית מכתים פרוטוקולים חלבון באמצעות Coomassie מבריק כחול (CBB), פתרונות עם תוכן גבוה של ממיסים אורגניים רעילים דליקים (אתנול או מתנול 2-Propanol) וחומצה אצטית משמשים קיבעון, מכתים ו destaining של חלבונים בג&#39;ל SDS לאחר עמודים. כדי לזרז את ההליך, חימום הפתרון מכתים לתנור המיקרוגל לזמן קצר משמש לעתים קרובות. בדרך כלל גורמת התאדות של מתנול רעילים או מסוכנים, אתנול או 2-Propanol ועל ריח חזק של חומצה אצטית במעבדה אשר יש להימנע בשל שיקולי בטיחות. בפרוטוקול שפורסם במקור בשתי בקשות לפטנט על ידי א.מ. Wondrak (US2001046709 (A1), US6319720 (B1)), הרכב חלופה לפתרון מכתים מתואר בה שום אורגני ממס או חומצה משמש. CBB הוא מומס במים bidistilled (60-80mg ליטר CBB לכל G-250) ו - 35 מ&quot;מ HCl הוא הוסיף כמתחם רק השני בפתרון מכתים. Staning CBB של הג&#39;ל נעשה לאחר שטיפה SDS-PAGE וממצה של הג&#39;ל במים bidistilled. על ידי חימום במהלך ג&#39;ל רחצה ו מכתים שלבים, התהליך יכול להסתיים מהר ולא compunds רעילים או מסוכנים הם מתאדים. צביעה של החלבונים מתרחשת כבר בתוך דקה 1 אחרי חימום ג&#39;ל מכתים פתרון והיא מפותחת אחרי 15-30 דקות עם רקע כחול מעט כי הוא destained לחלוטין על ידי שטיפה ממושכת של הג&#39;ל מוכתמת במים bidistilled, מבלי להשפיע על חלבון מוכתם להקות.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid at JoVE.com

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

<p class="jove_content">פרוטוקול קצר מכתים חלבון עם Coomassie מבריק כחול (CBB) G-250 ב ג&#39;לים polyacrylamide מתואר ללא שימוש בממיסים אורגניים או חומצה אצטית כמו הנהלים מכתים קלאסית עם CBB.</p>

הכתמה של חלבונים עם ג&#39;ל Coomassie G-250 ללא חומצה אצטית ממס אורגני

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Research

JoVE Journal

Biology

Staining Proteins in Gels

מכתים חלבונים ג&#39;ל

Following separation by electrophoretic methods, proteins in a gel can be detected by several staining methods. This unit describes protocols for ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

מהיר רגיש Colloidal Coomassie G-250 מכתים עבור חלבונים ג&#39;ל polyacrylamide

Coomassie Brilliant Blue (CBB) is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and ...

Profiling of Methyltransferases and Other <em>S</em>-adenosyl-<sub>L</sub>-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS)

Profiling of Methyltransferases and Other S-adenosyl-L-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry CCMS

פרופיל של Methyltransferases ועל אחרים<em> S</em>-Adenosyl-<sub> L</sub>-הומוציסטאין מחייב חלבונים על ידי ספקטרומטריית מתחם המיסה לכידה (CCMS)

There is a variety of approaches to reduce the complexity of the proteome on the basis of functional small molecule-protein interactions such as affinity ...

High-Throughput Measurement and Classification of Organic P in Environmental Samples

תפוקה גבוהה מדידה סיווג P אורגני דגימות סביבתיות

Many types of organic phosphorus (P) molecules exist in environmental samples1.  Traditional P measurements do not detect these organic P compounds since ...

Synthesis of Nine-atom Deltahedral Zintl Ions of Germanium and their Functionalization with Organic Groups

סינתזה של לתשעה אטום יונים Zintl Deltahedral של גרמניום functionalization שלהם עם קבוצות אורגניים

Although the first studies of Zintl ions date between the late 1890's and early 1930's they were not structurally characterized until many years later.1,2 ...

Genotyping of Plant and Animal Samples without Prior DNA Purification

Genotyping של דוגמאות צמחים ובעלי חיים, ללא טיהור DNA לפני

The Direct PCR approach facilitates PCR amplification directly from small amounts of unpurified samples, and is demonstrated here for several plant and ...

Analyzing and Building Nucleic Acid Structures with 3DNA

ניתוח ובניית מבני חומצות גרעין עם 3DNA

The 3DNA software package is a popular and versatile bioinformatics tool with capabilities to analyze, construct, and visualize three-dimensional nucleic ...

A Chemical Screening Procedure for Glucocorticoid Signaling with a Zebrafish Larva Luciferase Reporter System

הליך מיון כימי לGlucocorticoid איתות עם מערכת כתב דג הזברה הזחל בלוציפראז

Glucocorticoid stress hormones and their artificial derivatives are widely used drugs to treat inflammation, but long-term treatment with glucocorticoids ...

Sequence-specific Labeling of Nucleic Acids and Proteins with Methyltransferases and Cofactor Analogues

תיוג רצף ספציפי של חומצות גרעין וחלבונים עם Methyltransferases ואנלוגים כקו-פקטורים

S-Adenosyl-l-methionine (AdoMet or SAM)-dependent methyltransferases (MTase) catalyze the transfer of the activated methyl group from AdoMet to specific ...

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging (ESI)

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging ESI

הדמיה של חלבונים תיקון ה- DNA miniSOG תייג בשילוב עם אלקטרונים Spectroscopic הדמיה (ESI)

The limits to optical resolution and the challenge of identifying specific protein populations in transmission electron microscopy have been obstacles in ...