Name: staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid
Uploaded: 2009-08-14T00:00:00
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<p class="jove_content"> हम Ines Racké की तकनीकी सहायता को स्वीकार करना चाहते हैं. </p>

<p class="jove_title"> भाग 1: CBB धुंधला समाधान की तैयारी </p><ol><li> CBB के 60-80 मिलीग्राम G-250 bidistilled पानी की 1 लीटर में 2-4 घंटे के लिए सरगर्मी से भंग कर रहे हैं. अंत में, ध्यान केंद्रित एचसीएल के 3 मिलीलीटर एक मिनट के लिए सरगर्मी के साथ गहरे नीले सम?...

<ol>
	<li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+for+fast+visualization+of+protein.">Process for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li><li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+for+fast+visualization+of+protein.">Solution for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li></ol>

<ul><li> धोने कदम प्रोटीन के कुशल धुंधला के लिए महत्वपूर्ण हैं. 2 मिनट या पानी (50ml &lt;) की कम मात्रा के नीचे एक कम समय धोने पीली नीली प्रोटीन बैंड, सबसे अधिक संभावना जेल में उच्च अवशिष्ट एसडीएस की मात्रा के कारण में परिणाम ?...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AppliChem</td>
<td>A3480</td>
<td>any other CBB G-250 could be used as well</td>
</tr>
<tr>
<td>Concentrated HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid

<p class="jove_content">शास्त्रीय प्रोटीन धुंधला Coomassie खूब (CBB) ब्लू, विषैले और ज्वलनशील कार्बनिक (मेथनॉल, इथेनॉल, या 2-propanol) और सॉल्वैंट्स एसिटिक एसिड के उच्च सामग्री के साथ समाधान का उपयोग प्रोटोकॉल के निर्धारण के लिए उपयोग किया जाता है, धुंधला हो जाना और प्रोटीन की एक जेल में एसडीएस बाद destaining - PAGE. प्रक्रिया को गति, एक कम समय के लिए माइक्रोवेव ओवन में धुंधला समाधान हीटिंग के लिए अक्सर इस्तेमाल किया है. यह विषाक्त या खतरनाक मेथनॉल, इथेनॉल या 2-propanol और जो सुरक्षा कारणों की वजह से बचा जाना चाहिए प्रयोगशाला में एसिटिक एसिड के मजबूत गंध के वाष्पीकरण में आमतौर पर परिणाम. एक प्रोटोकॉल मूल EM Wondrak (US2001046709 (A1), US6319720 (B1)) द्वारा दो पेटेंट आवेदनों में प्रकाशित में, धुंधला समाधान के एक वैकल्पिक संरचना का वर्णन है जिसमें कोई विलायक कार्बनिक अम्ल या प्रयोग किया जाता है. CBB bidistilled पानी में भंग कर रहा है (60-CBB जी 250 प्रति लीटर के 80mg) और 35 मिमी एचसीएल केवल धुंधला समाधान में अन्य यौगिक के रूप में जोड़ा जाता है. जेल के CBB staning bidistilled पानी में जेल की एसडीएस पृष्ठ और पूरी तरह से धोने के बाद किया जाता है. धोने के दौरान जेल हीटिंग और कदम धुंधला करके इस प्रक्रिया को तेजी से समाप्त किया जा सकता है और कोई विषाक्त या खतरनाक compunds evaporating हैं. प्रोटीन का धुंधला 1 मिनट के भीतर पहले से ही समाधान धुंधला में जेल हीटिंग के बाद होता है और एक थोड़ा नीले रंग की पृष्ठभूमि है कि पूरी तरह से bidistilled पानी में दाग जेल के लंबे समय तक धोने के द्वारा destained है के साथ 15-30 मिनट के बाद पूरी तरह से सना हुआ प्रोटीन को प्रभावित किए बिना, विकसित बैंड.</p>

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Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

<p class="jove_content">Coomassie खूब (CBB) ब्लू polyacrylamide जैल में G-250 के साथ प्रोटीन धुंधला के लिए एक छोटी प्रोटोकॉल CBB के साथ शास्त्रीय धुंधला प्रक्रियाओं के रूप में कार्बनिक सॉल्वैंट्स या एसिटिक एसिड का उपयोग कर के बिना वर्णित है.</p>

कार्बनिक सॉल्वेंट और एसिटिक एसिड के बिना जी 250 Coomassie के साथ जैल में प्रोटीन की धुंधला

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Research

JoVE Journal

Biology

Staining Proteins in Gels

जैल में प्रोटीन धुंधला

Following separation by electrophoretic methods, proteins in a gel can be detected by several staining methods. This unit describes protocols for ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

फास्ट और संवेदनशील कोलाइडयन polyacrylamide जैल में Coomassie जी 250-प्रोटीन के लिए धुंधला

Coomassie Brilliant Blue (CBB) is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and ...

Profiling of Methyltransferases and Other <em>S</em>-adenosyl-<sub>L</sub>-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS)

Profiling of Methyltransferases and Other S-adenosyl-L-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry CCMS

Methyltransferases की रूपरेखा और अन्य<em> एस</em> Adenosyl<sub> एल</subकैद यौगिक मास स्पेक्ट्रोमेट्री (CCMS)> homocysteine ​​बाध्यकारी प्रोटीन

There is a variety of approaches to reduce the complexity of the proteome on the basis of functional small molecule-protein interactions such as affinity ...

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Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging (ESI)

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