Name: staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid
Uploaded: 2009-08-14T00:00:00
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<p class="jove_content">我々は、イネスRackéの技術支援に感謝したい。 </p>

<p class="jove_title">パート1：CBB染色液の調製</p><ol><li> CBB G - 250の60〜80 mgを2〜4時間攪拌することにより二回蒸留水1リットルに溶解されています。最後に、濃塩酸3mlを別分間攪拌しながら濃い青色溶液に添加し、後で使用するために暗所に保存されます。解決策は、その染色の効率を失うことなく、数ヶ月に数週間まで保存することができます。 </li><li>濃塩酸は、換気フードの下に使用される通常のケアのウント...

<ol>
	<li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+for+fast+visualization+of+protein.">Process for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li><li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+for+fast+visualization+of+protein.">Solution for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li></ol>

<ul><li>洗浄ステップは、タンパク質の効率的な染色のために重要です。 2分または水（&lt;50ミリリットル）の削減量以下に削減、洗浄時間は、ゲル中の残留SDSの高い金額に起因する可能性が最も高い淡いブルーのタンパク質のバンド、になる可能性があります。 </li><li>タンパク質は、質量分析によって分析することを予定している場合のバンドの強度が十分な強さになるまで、電子レンジで加熱ステップは、?...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AppliChem</td>
<td>A3480</td>
<td>any other CBB G-250 could be used as well</td>
</tr>
<tr>
<td>Concentrated HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid

<p class="jove_content">クマシーブリリアントブルー（CBB）、有毒で引火性の有機溶媒（メタノール、エタノールまたは2 - プロパノール）と酢酸の高い内容を持つソリューションを使用して古典的なタンパク質染色のプロトコールで染色し、SDS泳動後のゲル中のタンパク質の脱色、固定のために使用されています- PAGE。頻繁に使用されている短い時間のために電子レンジでの染色溶液を加熱し、手続きのスピードアップに。有毒または有害なメタノール、エタノールまたは2 - プロパノール及び安全性の考慮のために避けるべきラボにおける酢酸の強いにおいの蒸発でこれは通常、結果。もともとEM Wondrak（US2001046709（A1）、US6319720（B1））によって2つの特許出願で公開プロトコルでは、染色液の代替物はないの有機溶媒や酸が使用されていないで説明されています。 CBBは、蒸留水に溶解している（CBB G - 250リットル当たり60 - 80mg）、35 mMの塩酸は、染色液中の唯一の他の化合物として追加されます。ゲルのCBBのstaningは、蒸留水でゲルのSDS - PAGEと徹底した洗浄の後に行われます。洗浄および染色工程中にゲルを加熱することにより、プロセスをより速く仕上げることができるとは有毒または有害なcompundsは蒸発されていません。タンパク質の染色は、溶液を染色でゲルを加熱した後、1分以内にすでに発生し、完全に染色されたタンパク質に影響を与えずに、蒸留水で染色したゲルの長期にわたる洗浄によって完全に脱色され若干青色の背景色の15-30分後に開発されていますバンド。</p>

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Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

<p class="jove_content">クマシーブリリアントブルー（CBB）ポリアクリルアミドゲル中でのG - 250によるタンパク質染色用の短いプロトコルは、CBBと古典的な染色の手順のように有機溶剤または酢酸を使用せずに記述されています。</p>

クーマシー有機溶媒および酢酸のないG - 250でゲル中のタンパク質の染色

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Research

JoVE Journal

Biology

Staining Proteins in Gels

ゲルでタンパク質を染色

Following separation by electrophoretic methods, proteins in a gel can be detected by several staining methods. This unit describes protocols for ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

ポリアクリルアミドゲルでのタンパク質の迅速かつ高感度コロイドクマG - 250染色

Coomassie Brilliant Blue (CBB) is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and ...

Profiling of Methyltransferases and Other <em>S</em>-adenosyl-<sub>L</sub>-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS)

Profiling of Methyltransferases and Other S-adenosyl-L-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry CCMS

メチルトランスフェラーゼのプロファイリングおよびその他の<em> S</em> -アデノシル-<sub> L</subキャプチャの複合質量分析法（CCMS）別> -ホモシステイン結合タンパク質

There is a variety of approaches to reduce the complexity of the proteome on the basis of functional small molecule-protein interactions such as affinity ...

High-Throughput Measurement and Classification of Organic P in Environmental Samples

環境試料中の有機Pのハイスループット測定と分類

Many types of organic phosphorus (P) molecules exist in environmental samples1.  Traditional P measurements do not detect these organic P compounds since ...

Synthesis of Nine-atom Deltahedral Zintl Ions of Germanium and their Functionalization with Organic Groups

ゲルマニウムと有機基との官能の9原子Deltahedral Zintlイオンの合成

Although the first studies of Zintl ions date between the late 1890's and early 1930's they were not structurally characterized until many years later.1,2 ...

Genotyping of Plant and Animal Samples without Prior DNA Purification

前のDNA精製せずに植物や動物のサンプルの遺伝子型

The Direct PCR approach facilitates PCR amplification directly from small amounts of unpurified samples, and is demonstrated here for several plant and ...

Analyzing and Building Nucleic Acid Structures with 3DNA

3DNAを有する核酸構造の分析と構築

The 3DNA software package is a popular and versatile bioinformatics tool with capabilities to analyze, construct, and visualize three-dimensional nucleic ...

A Chemical Screening Procedure for Glucocorticoid Signaling with a Zebrafish Larva Luciferase Reporter System

ゼブラフィッシュ幼虫ルシフェラーゼレポーターシステムを用いたグルココルチコイドシグナル伝達のための化学スクリーニング法

Glucocorticoid stress hormones and their artificial derivatives are widely used drugs to treat inflammation, but long-term treatment with glucocorticoids ...

Sequence-specific Labeling of Nucleic Acids and Proteins with Methyltransferases and Cofactor Analogues

メチルトランスフェラーゼと補因子類似体核酸およびタンパク質の配列特異的標識化

S-Adenosyl-l-methionine (AdoMet or SAM)-dependent methyltransferases (MTase) catalyze the transfer of the activated methyl group from AdoMet to specific ...

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging (ESI)

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging ESI

電子分光イメージングと組み合わせたminiSOGタグ付きのDNA修復タンパク質の可視化（ESI）

The limits to optical resolution and the challenge of identifying specific protein populations in transmission electron microscopy have been obstacles in ...