Name: staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid
Uploaded: 2009-08-14T00:00:00
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<p class="jove_content"> 우리는 이네스 Racké의 기술 지원을 인정하고 싶습니다. </p>

<p class="jove_title"> 1 부 : CBB의 얼룩 솔루션의 준비 </p><ol><li> CBB의 60-80 MG는 G - 250은 2-4시간에 대한 감동으로 bidistilled 물 1리터에 녹아 있습니다. 마지막으로, 집중 HCL 3 ML은 다른 분간 교반과 함께 진한 파란색 솔루션에 추가하고 나중에 사용하기 위해 어둠에 저장됩니다. 이 솔루션은 그 얼룩의 효율성을 잃지 않고 몇 개월까지 주 동안 최대 저장할 수 있습니다. </li><li> 집중 HCL은 퓸 후드에서 사용하는 일반적인 치료...

<ol>
	<li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+for+fast+visualization+of+protein.">Process for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li><li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+for+fast+visualization+of+protein.">Solution for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li></ol>

<ul><li> 세척 단계는 단백질의 효율적인 얼룩을 위해 중요하다. 2 분 또는 물 (&lt;50ml)의 감소 볼륨 아래의 감소 세척 시간은 겔에 잔류 SDS 높은 금액으로 인한 가능성이 가장 높은 하늘색 단백질 밴드에 발생할 수 있습니다. </li><li> 단백질은 질량 분광법으로 분석 될 경우, 전자 레인지에서 가열 단계는 생략한다, 10의 각 단계에서 분 및 밴드 강도까지 연장 얼룩 시간까지 확장 젤의 세탁 시간은 충분히 강하 . 질량 분?...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AppliChem</td>
<td>A3480</td>
<td>any other CBB G-250 could be used as well</td>
</tr>
<tr>
<td>Concentrated HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid

<p class="jove_content">쿠매시 블리언트 블루 (CBB), 독성 및 인화성 유기 용제 (메탄올, 에탄올 또는 2 - 프로파놀)과 초산 높은 내용으로 솔루션을 사용하는 고전적인 단백질 얼룩 프로토콜에 얼룩 및 SDS 후 젤의 단백질 destaining, 고정에 사용됩니다 페이지. 짧은 시간 동안 전자렌지에 얼룩 솔루션을 가열, 절차를 속도를하는 것은 자주 사용됩니다. 독성 또는 유해 메탄올, 에탄올 또는 2 - 프로파놀 안전 고려 사항으로 인해 피해야한다 실험실에서 초산의 강한 냄새의 증발이 일반적으로 발생합니다. 원래 EM Wondrak (US2001046709 (A1), US6319720 (B1))하여 두 특허 출원에 발표된 프로토콜에서 얼룩 솔루션의 대체 성분이 더 용매 유기 또는 산성이 사용되지하는에 설명되어 있습니다. CBB는 bidistilled 물속에 녹아있는 것입니다 (CBB G - 250 당 리터의 60 80mg) 35 MM HCL은 얼룩 솔루션에서 유일하게 다른 화합물로 추가됩니다. 젤의 CBB의 staning는 bidistilled 물에 젤의 SDS - PAGE와 철저한 세척 후에 이루어집니다. 세탁 중에 젤 가열 및 단계를 얼룩으로, 프로세스는 빨리 완료 될 수 있으며, 아무런 독성 또는 유해 compunds이 증발되지 않습니다. 단백질 얼룩이 솔루션을 얼룩에 젤 가열 후 일분 이내에 이미 발생하고 완전히 스테인드 단백질에 영향을주지 않고, bidistilled 물속에 스테인드 젤의 장기간 세척하여 완전히 destained하는 약간 파란색 배경과 15-30 분 후에 개발 밴드.</p>

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Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

<p class="jove_content">쿠매시 블리언트 블루 (CBB)의 polyacrylamide 젤의 G - 250로 단백질 얼룩에 대한 짧은 프로토콜은 CBB와 고전적인 얼룩 절차에서와 같이 유기 용제 또는 초산을 사용하지 않고도 설명되어 있습니다.</p>

유기 용매 및 초산없이 쿠매시 G - 250로 젤의 단백질 염색법

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Research

JoVE Journal

Biology

Staining Proteins in Gels

젤의 단백질 염색법

Following separation by electrophoretic methods, proteins in a gel can be detected by several staining methods. This unit describes protocols for ...

연구

생물학

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

Polyacrylamide의 젤의 단백질에 대한 신속하고 민감한 콜로이드 쿠매시 G - 250 스테 이닝

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