Name: staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid
Uploaded: 2009-08-14T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid at JoVE.com

<p class="jove_content"> Мы хотели бы выразить признательность технической помощи Инес Racké. </p>

<p class="jove_title"> Часть 1: подготовка решения окрашивания CBB </p><ol><li> 60-80 мг CBB G-250 растворяют в 1 литре бидистиллированной воды при перемешивании в течение 2-4 часов. Наконец, 3 мл концентрированной соляной кислоты добавляется в темно-синий раствор при перемешивании в течение другой минуты и хранить в темном м...

<ol>
	<li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+for+fast+visualization+of+protein.">Process for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li><li>Wondrak, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+for+fast+visualization+of+protein.">Solution for fast visualization of protein.</a> <em style='font-style: italic'>US patent</em>. , (2001).</li></ol>

<ul><li> Промывки имеют решающее значение для эффективного окрашивания белков. Сократить время стирки ниже 2 мин или уменьшается объем воды (&lt;50 мл) может привести к голубой белковых полос, скорее всего, за счет повышения количества остаточного SDS в геле. </li><li> Если белки будут проанализированы масс-спек...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AppliChem</td>
<td>A3480</td>
<td>any other CBB G-250 could be used as well</td>
</tr>
<tr>
<td>Concentrated HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

staining of proteins in gels with coomassie g-250 without organic solvent and acetic acid

<p class="jove_content">В классической белка окрашивания протоколы с использованием Кумасси бриллиантовый синий (CBB), растворы с высоким содержанием токсичных и горючих органических растворителей (метанол, этанол или 2-пропанол) и уксусную кислоту используют для фиксации, окраски и destaining белков в геле после SDS -PAGE. Чтобы ускорить процедуру, отопление окрашивание раствора в микроволновой печи в течение короткого времени часто используется. Это обычно приводит к испарению токсичных или опасных метанол, этанол или 2-пропанол и сильный запах уксусной кислоты в лаборатории, которых следует избегать из-за соображений безопасности. В протокол, который был опубликован в двух патентных заявок Е. М. Wondrak (US2001046709 (A1), US6319720 (В1)), альтернативный состав окрашивание раствора описывается, в которых не органическим растворителем или кислотой. CBB растворяют в бидистиллированной воде (60-80мг в CBB G-250 на литр) и 35 мМ HCl добавляется как только другие соединения в красящим раствором. Staning CBB геля осуществляется после SDS-PAGE и тщательное мытье геля в бидистиллированной воде. При нагревании гель во время стирки и окрашивания шаги, процесс может быть завершен быстрее и не токсичных или опасных compunds испаряются. Окрашивание белков происходит уже в течение 1 минуты после нагрева геля в красящим раствором и полностью разработаны через 15-30 мин с немного синего фона, обесцвечивают полностью длительное мытье окрашенных геля в бидистиллированной воде, без ущерба для окрашенных белков полосы.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid at JoVE.com

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

<p class="jove_content">Короткий протокол для белка окрашивание Кумасси бриллиантовый синий (CBB) G-250 в полиакриламидном геле описывается без использования органических растворителей или уксусной кислоты, как в классической процедуры окрашивания CBB.</p>

Окрашивание белков в гелях Кумасси G-250 без органических растворителей и уксусной кислоты

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Research

JoVE Journal

Biology

Staining Proteins in Gels

Окрашивание белков в гелях

Following separation by electrophoretic methods, proteins in a gel can be detected by several staining methods. This unit describes protocols for ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

Быстро и чувствительной Коллоидное Кумасси G-250 для окрашивания белков в полиакриламидном геле

Coomassie Brilliant Blue (CBB) is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and ...

Profiling of Methyltransferases and Other <em>S</em>-adenosyl-<sub>L</sub>-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS)

Profiling of Methyltransferases and Other S-adenosyl-L-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry CCMS

Профилирование метилтрансферазы и других<em> S</em>-Аденозил-<sub> L</sub>-Гомоцистеин-связывающих белков Захват соединения масс-спектрометрия (CCMS)

There is a variety of approaches to reduce the complexity of the proteome on the basis of functional small molecule-protein interactions such as affinity ...

High-Throughput Measurement and Classification of Organic P in Environmental Samples

Высокая пропускная измерения и классификации органических P в пробах окружающей среды

Many types of organic phosphorus (P) molecules exist in environmental samples1.  Traditional P measurements do not detect these organic P compounds since ...

Synthesis of Nine-atom Deltahedral Zintl Ions of Germanium and their Functionalization with Organic Groups

Синтез девять атомов Deltahedral Zintl ионы германия и их функционализации с органическими группами

Although the first studies of Zintl ions date between the late 1890's and early 1930's they were not structurally characterized until many years later.1,2 ...

Genotyping of Plant and Animal Samples without Prior DNA Purification

Генотипирование растений и животных образцов без предварительного очистки ДНК

The Direct PCR approach facilitates PCR amplification directly from small amounts of unpurified samples, and is demonstrated here for several plant and ...

Analyzing and Building Nucleic Acid Structures with 3DNA

Анализ и построение структуры нуклеиновых кислот с 3DNA

The 3DNA software package is a popular and versatile bioinformatics tool with capabilities to analyze, construct, and visualize three-dimensional nucleic ...

A Chemical Screening Procedure for Glucocorticoid Signaling with a Zebrafish Larva Luciferase Reporter System

Процедура Скрининг Обработка глюкокортикоидных сигнализации с корреспондентом системе данио рерио Личинка люциферазы

Glucocorticoid stress hormones and their artificial derivatives are widely used drugs to treat inflammation, but long-term treatment with glucocorticoids ...

Sequence-specific Labeling of Nucleic Acids and Proteins with Methyltransferases and Cofactor Analogues

Последовательность конкретных Маркировка нуклеиновых кислот и белков с метилтрансферазы и кофактора аналогов

S-Adenosyl-l-methionine (AdoMet or SAM)-dependent methyltransferases (MTase) catalyze the transfer of the activated methyl group from AdoMet to specific ...

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging (ESI)

Visualization of miniSOG Tagged DNA Repair Proteins in Combination with Electron Spectroscopic Imaging ESI

Визуализация miniSOG меткой репарации ДНК белков в сочетании с электронной спектроскопии изображений (ESI)

The limits to optical resolution and the challenge of identifying specific protein populations in transmission electron microscopy have been obstacles in ...