Name: a multi-compartment cns neuron-glia co-culture microfluidic platform
Uploaded: 2009-09-10T16:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מכוני הבריאות הלאומיים / המכון הלאומי לבריאות הנפש (NIH / NIMH) מענק # 1R21MH085267.

חלק 1: הכנת תבנית אב תא רב נוירון שיתוף התרבות ייצור המכשיר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צעד ראשון לפברק האב PMMA הוא להפוך תאים 3.5 מ&quot;מ עמוק. אחת תא סומה ושישה האקסון / גליה תאים מוגדרים על בלוק PMMA באמצעות כרסום מיקרו מכונה (MDX-40, רולנד או כל מכונת כרס?...

<ol>
	<li>Sherman, D. L., Brophy, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+axon+ensheathment+and+myelin+growth.">Mechanisms of axon ensheathment and myelin growth.</a> Nature Reviews. 6, 683-690 (2005).</li><li>Xia, Y., Whitesides, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soft+Lithography.">Soft Lithography.</a> Angew. Chem. 37, 550-575 (1998).</li><li>Taylor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+culture+platform+for+neuroscience+research.">Microfluidic culture platform for neuroscience research.</a> Nature Methods. 2, 599-605 (2005).</li><li>Li, J., Baud, O., Vartanian, T., Volpe, J. J., Rosenberg, P. A., A, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxynitrite+generated+by+inducible+nitric+oxide+synthase+and+NADPH+oxidase+mediates+microglial+toxicity+to+oligodendrocytes.">Peroxynitrite generated by inducible nitric oxide synthase and NADPH oxidase mediates microglial toxicity to oligodendrocytes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 102, 9936-9941 (2005).</li></ol>

פיתחנו תא רב שיתוף תרבות פלטפורמה לחקר יונקים CNS-האקסון גליה אינטראקציה. אקסונים CNS בודדו בהצלחה מתא גופים העצבית / דנדריטים, ו oligodendrocytes היו בהצלחה שיתוף בתרבית בתוך המכשיר. צפיפות Neuron יכולים להיות מגוונים על ידי יישומים, אבל בריכוז נמוך מדי או גבוה מדי עלול לגרום לתאי...

a multi-compartment cns neuron-glia co-culture microfluidic platform

אנו מציגים רומן תא רב שיתוף תרבות נוירון microsystem פלטפורמה למחקר האקסון גליה ב-CNS במבחנה אינטראקציה, המסוגלת לנהל עד שישה ניסויים עצמאיים במקביל עבור תפוקה גבוהה יותר. פיתחנו שיטת ייצור חדשים כדי ליצור התקנים microfluidic שיש מבנים בקנה מידה הן מיקרו ומקרו בתוך המכשיר אותו באמצעות תהליך רך ליתוגרפיה יחיד, מה שמאפשר ייצור המוני עם הדירות טוב. תא רב פלטפורמת microfluidic שיתוף תרבות מורכבת במדור אחד עבור סומה נוירונים ושישה האקסון / גליה מדורים oligodendrocytes (OLS). תא סומה האקסון ו / גליה תאים המחוברים באמצעות מערכים של האקסון, המנחה microchannels המתפקדים מחסומים פיזיים להגביל סומה עצבי בתא סומה, תוך מתן אפשרות האקסונים לגדול לתוך האקסון / תאים גליה. OLS נטען לתוך האקסון / גליה תאים יכולים לתקשר רק עם אקסונים אך לא עם סומה או דנדריטים עצביים, מה שמאפשר מקומי האקסון, גליה מחקרים אינטראקציה. Microchannels גם איפשר הבידוד fluidic בין תאים, המאפשר six ניסויים עצמאיים להתנהל על התקן יחיד עבור תפוקה גבוהה יותר. רכים ליתוגרפיה באמצעות פולי (dimethylsiloxane) (PDMS) היא טכניקה הנמצאת בשימוש נפוץ microdevices ביו. מאגרים על מכשירים אלה מוגדרים בדרך כלל על ידי ניקוב ידני. למרות יישור פשוטים, עניים הטבע זמן רב של התהליך עושה את התהליך הזה אינו מתאים כאשר מספר גדול של מאגרי יש ליצור שוב ושוב. השיטה החדשה שפותחה לא דורשים ניקוב ידני של מאגרים, להתגבר על מגבלות כאלה. ראשית, שבעה מאגרי מים (עומק: 3.5 מ&quot;מ) נעשו על בלוק פולי (PMMA) (methacrylate מתיל) באמצעות מכונת כרסום מיקרו. ואז, מערכים של microstructures רכס, מפוברק על מצע זכוכית, היו חמים בולטות נגד בבלוק PMMA להגדיר microchannels המחברים את סומה ואת האקסון / גליה תאים. תהליך זה הביא המאקרו היקף המאגרים (3.5 מ&quot;מ) ומיקרו בקנה מידה ערוצים (2.5 מיקרומטר) כדי לחפוף בתוך מאסטר PMMA יחיד. העתק PDMS ששימש מאסטר עובש הושג באמצעות רך ליתוגרפיה והמכשיר הסופי PDMS היה משוכפל מן האדון הזה. נוירונים ראשי מ E16-18 חולדות הועמסו לתא סומה ותרבותי במשך שבועיים. לאחר שבוע של תרבית תאים, אקסונים חצה microchannels והקימו רשת axonal שכבת רק בתוך האקסון / גליה תאים. אקסונים גדל באופן אחיד במשך שש האקסון / גליה תאים ו OLS מ P1-2 חולדות נוספו האקסון / גליה תאים ב 14 ימים במבחנה לתרבות משותפת.

Watch this Scientific Journal Video about A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform at JoVE.com

A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform

פיתחנו רומן רב תא שיתוף תרבות נוירון פלטפורמה עבור microsystem ב CNS מחקר במבחנה אינטראקציה האקסון, גליה. פלטפורמה המסוגלת לנהל עד שישה ניסויים עצמאיים במקביל היה מפוברק באמצעות פיתח מאקרו / מיקרו שיטת ייצור כלאיים.

תא Multi-CNS-Neuron גליה שותף תרבות Microfluidic רציף

We present a novel multi-compartment neuron co-culture microsystem platform for in vitro CNS axon-glia interaction research, capable of conducting up to ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

Dissection של מערכת העצבים המרכזית הזחל ב תסיסנית melanogaster

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

התקן Gradient מניבות Microfluidic עבור ביולוגיה של התא

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

Cell Capture Using a Microfluidic Device

תא לכידת באמצעות מכשיר microfluidic

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

עצב Astrocyte שותף תרבות Assay לניתוח תכולה גבוהה של neurotoxicity

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

בדיקה Microfluidic: מבצע ושימוש לעיבוד Surface לוקליזציה

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...

Platelet Adhesion and Aggregation Under Flow using Microfluidic Flow Cells

הדבקה צבירת טסיות דם תחת זרימה באמצעות תאים תזרים Microfluidic

Platelet aggregation occurs in response to vascular injury where the extracellular matrix below the endothelium has been exposed. The platelet adhesion ...

A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device

Multi-פרמטרית Perifusion איילט מערכת בתוך התקן Perifusion Microfluidic

A microfluidic islet perifusion device was developed for the assessment of dynamic insulin secretion of multiple islets and simultaneous fluorescence ...

Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions

Microfluidic משותף התרבות של תאים וחיידקים אפיתל לחקירת מסיסים אותות בתיווך אינטראקציות

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria coexist. It has ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

מכשיר microfluidic לכימות Chemotaxis חיידקים Gradients ריכוז אורווה

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Modified ES / OP9 Co-Culture Protocol Provides Enhanced Characterization of Hematopoietic Progeny

השתנה ES / OP9 שותף לתרבות פרוטוקול מספקת שירותי אפיון משופר צאצאיהם hematopoietic

The in vitro differentiation of ES cells towards a hematopoietic cell fate is useful when studying cell populations that are difficult to access in vivo ...