Name: live dissection of drosophila embryos: streamlined methods for screening mutant collections by antibody staining
Uploaded: 2009-12-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining at JoVE.com

हम इन प्रोटोकॉल के विकास के लिए उनके योगदान के लिए Nicki फॉक्स और Aloisia स्च्मिद धन्यवाद. KZ, NS28182 के लिए यह काम एक NIH RO1 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.

परिचय ड्रोसोफिला भ्रूण भ्रूण विकास के 14 और 17 चरणों के बीच आसानी से हो &quot;पट्टिका&quot; तैयारी उत्पन्न विच्छेदित कर सकते हैं . इन तैयारियों में, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (CNS) के बीच नीचे चलाता है, औ?...

<ol>
	<li>Patel, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+neuronal+subsets+and+other+cell+types+in+whole-mount+Drosophila+embryos+and+larvae+using+antibody+probes.">Imaging neuronal subsets and other cell types in whole-mount Drosophila embryos and larvae using antibody probes.</a> Methods Cell Biol. 44, 445-487 (1994).</li><li>Desai, C. J., Gindhart, J. G., Goldstein, L. S., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+tyrosine+phosphatases+are+required+for+motor+axon+guidance+in+the+Drosophila+embryo.">Receptor tyrosine phosphatases are required for motor axon guidance in the Drosophila embryo.</a> Cell. 84, 599-609 (1996).</li><li>Sun, Q., Schindelholz, B., Knirr, M., Schmid, A., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+genetic+interactions+among+four+receptor+tyrosine+phosphatases+regulate+axon+guidance+in+Drosophila.">Complex genetic interactions among four receptor tyrosine phosphatases regulate axon guidance in Drosophila.</a> Molecular and cellular neurosciences. 17, 274-291 (2001).</li><li>Schmid, A., Schindelholz, B., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+RNAi:+a+method+for+evaluating+the+functions+of+gene+families+in+Drosophila.">Combinatorial RNAi: a method for evaluating the functions of gene families in Drosophila.</a> Trends in neurosciences. 25, 71-74 (2002).</li><li>Fox, A. N., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heparan+sulfate+proteoglycan+syndecan+is+an+in+vivo+ligand+for+the+Drosophila+LAR+receptor+tyrosine+phosphatase.">The heparan sulfate proteoglycan syndecan is an in vivo ligand for the Drosophila LAR receptor tyrosine phosphatase.</a> Curr Biol. 15, 1701-1711 (2005).</li></ol>

हमें उम्मीद है कि इस वीडियो प्रदर्शन रहते भ्रूण विच्छेदन और पर्याप्त विस्तार में धुंधला हो जाना है कि वे अब आसानी से कर सकते हैं किसी भी व्यक्ति जो ड्रोसोफिला आनुवंशिकी और भ्रूणविज्ञान में कुछ अनु...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Borosilicate Tubing With Filament </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instrument</td>
<td>BF120-60-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Narishige model PC-10 needle puller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Narishige</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tubes pulled using a heater level of 58.9</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

live dissection of drosophila embryos: streamlined methods for screening mutant collections by antibody staining

ड्रोसोफिला भ्रूण भ्रूण विकास के 14 और 17 चरणों के बीच आसानी से हो &quot;पट्टिका&quot; तैयारी उत्पन्न विच्छेदित कर सकते हैं . इन तैयारियों में, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के बीच नीचे चलाता है, और शरीर की दीवारों द्वारा flanked है. कई अलग अलग phenotypes ऐसी तैयारी का उपयोग कर जांच की गई है. ज्यादातर मामलों में, fillets एंटीबॉडी से सना हुआ तय पूरे माउंट भ्रूण के विच्छेदन के द्वारा उत्पन्न किया गया. &quot;ये तय dissections&quot; कुछ नुकसान है, लेकिन. वे निष्पादित करने के लिए समय लेने हैं, और यह मुश्किल है के शेयरों में जो परिवर्तन GFP balancer के गुणसूत्रों से अधिक रखा जाता है से उत्परिवर्ती भ्रूण (GFP नकारात्मक) सॉर्ट है. 2002 के बाद से, हमारे समूह की कमी और अस्थानिक अभिव्यक्ति स्क्रीन आयोजन किया गया है अनाथ रिसेप्टर्स के लिए ligands की पहचान. आदेश में यह करने के लिए, हम रहते भ्रूण विच्छेदन और संतुलित लाइनों के सैकड़ों युक्त संग्रह के एंटीबॉडी धुंधला के लिए सुव्यवस्थित प्रोटोकॉल विकसित किया है. हम यह निष्कर्ष निकाला है कि यह काफी अधिक कुशल है तय विच्छेदन के द्वारा की तुलना में रहते विच्छेदन के द्वारा शेयरों के बड़े संग्रह में phenotypes की जांच. प्रोटोकॉल यहाँ वर्णित का प्रयोग, एक एकल प्रशिक्षित व्यक्ति phenotypes के लिए प्रति दिन 10 लाइनों, प्रत्येक पंक्ति से एक यौगिक खुर्दबीन के तहत 4-7 उत्परिवर्ती भ्रूण की जांच करने के लिए स्क्रीन कर सकते हैं. यह सूक्ष्म, कम penetrance phenotypes प्रदान म्यूटेशनों, के बाद से प्रति पंक्ति 70 hemisegments उच्च वृद्धि पर एक 40x लेंस पानी विसर्जन के साथ रन बनाए हैं की पहचान की अनुमति देता है.

Watch this Scientific Journal Video about Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining at JoVE.com

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

हम विशिष्ट जीनोटाइप का ड्रोसोफिला भ्रूण की &quot;पट्टिका&quot; तैयारी पैदा करने के लिए एक सुव्यवस्थित प्रोटोकॉल का वर्णन. इस प्रोटोकॉल आनुवंशिक स्क्रीन की एक किस्म के कुशल निष्पादन की अनुमति देता है. यह भी देर से भ्रूण में संरचनाओं के उत्कृष्ट दृश्य की अनुमति देता है.

के लाइव विच्छेदन ड्रोसोफिला भ्रूण एंटीबॉडी धुंधला द्वारा उत्परिवर्ती संग्रह स्क्रीनिंग के लिए सुव्यवस्थित तरीके

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Dissection of Drosophila Ovaries

ड्रोसोफिला अंडाशय के विच्छेदन

Dissection of 6.5 dpc Mouse Embryos

6.5 डीपीसी माउस भ्रूण के विच्छेदन

Analysis of gene expression patterns during early stages of mammalian embryonic development can provide important clues about gene function, cell-cell ...

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

चिकी में पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला के लिए विधि

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Drosophila Larval NMJ Dissection

ड्रोसोफिला लारवल NMJ विच्छेदन

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

की तैयारी ड्रोसोफिला लाइव इमेजिंग के लिए भ्रूण हैंगिंग ड्रॉप प्रोटोकॉल का उपयोग करना

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

एंटीबॉडी लेबल के लिए ड्रोसोफिला Polytene क्रोमोजोम Squashes की तैयारी

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

ड्रोसोफिला भ्रूण में vivo centrifugation

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

के ईमानदार इमेजिंग ड्रोसोफिला भ्रूण

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

DsRNA इंजेक्शन द्वारा हस्तक्षेप आरएनएआई में ड्रोसोफिला भ्रूण

Genetic screening is one of the most powerful methods available for gaining insights into complex biological process 1. Over the years many improvements ...

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

के विच्छेदन और धुंधला ड्रोसोफिला लारवल अंडाशय

Many organs depend on stem cells for their development during embryogenesis and for maintenance or repair during adult life. Understanding how stem cells ...