Name: live dissection of drosophila embryos: streamlined methods for screening mutant collections by antibody staining
Uploaded: 2009-12-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining at JoVE.com

Biz Nicki Fox ve Aloisia Schmid, bu protokollerin gelişmesine yaptıkları katkılar için teşekkür ederiz. Bu çalışma, KZ, NS28182 bir NIH RO1 hibe tarafından desteklenmiştir.

Giriş Embriyonik gelişim aşamaları 14 ve 17 arasında Drosophila embriyolar &quot;fileto&quot; hazırlıkları kolayca oluşturmak için disseke edilebilir. Bu hazırlıkların ortasında, merkezi sinir sistemi (MSS) aşağı doğru akıyor ve beden duvarları ile çevrili. Gut kaldırılır. Hazırlık ve müdahale doku olduğundan antikorlar ile boyanarak, fileto, tüm monte embriyolar daha çok merkezi sinir sistemi ve vücut duvarı yapıları (örn. motor aksonlar, k...

<ol>
	<li>Patel, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+neuronal+subsets+and+other+cell+types+in+whole-mount+Drosophila+embryos+and+larvae+using+antibody+probes.">Imaging neuronal subsets and other cell types in whole-mount Drosophila embryos and larvae using antibody probes.</a> Methods Cell Biol. 44, 445-487 (1994).</li><li>Desai, C. J., Gindhart, J. G., Goldstein, L. S., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+tyrosine+phosphatases+are+required+for+motor+axon+guidance+in+the+Drosophila+embryo.">Receptor tyrosine phosphatases are required for motor axon guidance in the Drosophila embryo.</a> Cell. 84, 599-609 (1996).</li><li>Sun, Q., Schindelholz, B., Knirr, M., Schmid, A., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+genetic+interactions+among+four+receptor+tyrosine+phosphatases+regulate+axon+guidance+in+Drosophila.">Complex genetic interactions among four receptor tyrosine phosphatases regulate axon guidance in Drosophila.</a> Molecular and cellular neurosciences. 17, 274-291 (2001).</li><li>Schmid, A., Schindelholz, B., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+RNAi:+a+method+for+evaluating+the+functions+of+gene+families+in+Drosophila.">Combinatorial RNAi: a method for evaluating the functions of gene families in Drosophila.</a> Trends in neurosciences. 25, 71-74 (2002).</li><li>Fox, A. N., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heparan+sulfate+proteoglycan+syndecan+is+an+in+vivo+ligand+for+the+Drosophila+LAR+receptor+tyrosine+phosphatase.">The heparan sulfate proteoglycan syndecan is an in vivo ligand for the Drosophila LAR receptor tyrosine phosphatase.</a> Curr Biol. 15, 1701-1711 (2005).</li></ol>

Biz bu video gösteri artık kolayca Drosophila genetik ve embriyoloji bazı deneyimi olan herhangi bir kişi tarafından idam edilebilir canlı embriyo diseksiyon ve yeterli ayrıntıda boyama yöntemleri görüntülenir olduğunu umuyoruz. Tabii ki, öncelikle diseksiyonları kendileri için önemli bir uygulama hala gerekli olacaktır. Bizim tecrübelerimize göre, her canlı diseksiyon yöntemleri öğrenir kişi onu / onu en hızlı, yüksek kaliteli dizilmiş diseksiyonları üretmek için izin veren bir ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Borosilicate Tubing With Filament </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instrument</td>
<td>BF120-60-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Narishige model PC-10 needle puller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Narishige</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tubes pulled using a heater level of 58.9</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

live dissection of drosophila embryos: streamlined methods for screening mutant collections by antibody staining

Embriyonik gelişim aşamaları 14 ve 17 arasında Drosophila embriyolar &quot;fileto&quot; hazırlıkları kolayca oluşturmak için disseke edilebilir. Bu hazırlıkların, merkezi sinir sisteminin ortasında aşağı doğru akıyor ve beden duvarları ile çevrili. Birçok farklı fenotipleri Bu hazırlıkların kullanılarak incelenmiştir. Çoğu durumda, fileto antikor lekeli sabit tüm monte embriyoların diseksiyon tarafından üretildi. Bu &quot;sabit diseksiyonları&quot; Ancak, bazı dezavantajları var. Onlar çalıştırmak için zaman alıcı ve mutant (GFP-negatif) mutasyonlar GFP dengeleyici kromozom üzerinde tutulur stokları embriyolar sıralamak için zordur. 2002 yılından bu yana, bizim grup yetim reseptörlerine ligandlar tanımlamak için eksikliği ve ektopik ifade ekranlar yürütülmesi olmuştur. Bunu yapmak için, canlı embriyo diseksiyon ve dengeli hatları yüzlerce içeren koleksiyonlar antikor boyama aerodinamik protokolleri geliştirmiştir. Biz sabit diseksiyon ile daha canlı diseksiyon stoklarının büyük koleksiyonlarda fenotipleri incelemek için çok daha verimli olduğu sonucuna varmışlardır. Burada açıklanan protokol kullanarak, tek bir bileşik mikroskop altında inceleyerek her satırın 4-7 mutant embriyolar fenotipleri için gün başına 10 satır, eğitimli birey ekranı. Bu satır başına kadar 70 hemisegments 40X su daldırma lens ile yüksek büyütmede gol beri mutasyonlar, ince, düşük penetrans fenotipleri görüşmekte belirlenmesini sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining at JoVE.com

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Biz belirli genotipler Drosophila embriyolar &quot;fileto&quot; hazırlıkları üretmek için akıcı bir protokol açıklar. Bu protokol, genetik ekranlardan çeşitli verimli bir şekilde yürütülmesini sağlar. Aynı zamanda geç embriyo yapıları mükemmel görselleştirme sağlar.

VE Canlı Diseksiyon Drosophila Embriyolar: Aerodinamik Antikor Boyama Mutant Koleksiyonlar Eleme Yöntemleri

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Dissection of Drosophila Ovaries

Drosophila Yumurtalıkların diseksiyonu

Biyoloji

Dissection of 6.5 dpc Mouse Embryos

6.5 DPC Fare Embriyolar diseksiyonu

Analysis of gene expression patterns during early stages of mammalian embryonic development can provide important clues about gene function, cell-cell ...

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

Chick Tüm Dağı Antikor Boyama Yöntemi

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Drosophila Larval NMJ Dissection

Drosophila Larvaların NMJ Diseksiyon

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

Hazırlanması Drosophila</emAsma Bırak Protokolü kullanarak Canlı Görüntüleme> Embriyolar

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

Antikor Etiketleme Drosophila politen Kromozom kabak hazırlanması

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Drosophila Embriyolar Santrifüj

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

VE Dik Görüntüleme Drosophila Embriyolar

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

DsRNA Enjeksiyon RNAi Girişim içine Drosophila Embriyolar

Genetic screening is one of the most powerful methods available for gaining insights into complex biological process 1. Over the years many improvements ...

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Diseksiyon ve boyanması Drosophila Larvaların Yumurtalıkların

Many organs depend on stem cells for their development during embryogenesis and for maintenance or repair during adult life. Understanding how stem cells ...