Name: automated microfluidic blood lysis protocol for enrichment of circulating nucleated cells
Uploaded: 2009-12-31T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Microfluidic Blood Lysis Protocol for Enrichment of Circulating Nucleated Cells at JoVE.com

وقد تم دعم البحوث التي أجراها والاس جائزة مؤسسة حاء كولتر الوظيفي المبكر في البحوث بالحركة. بفضل تيم اندروز ، طب أمراض الدم / الأورام ، للمساعدة في جمع عينات من الدم. كما شكر للدكتور سام ولهوسان ، وتدفق الخلوي الأساسية ، وجيمس غراهام براون مركز السرطان ، للمساعدة في تشغيل عينات التدفق الخلوي.

الجزء 1. ميكروفلويديك جهاز تلفيق تم إنشاء قالب السيليكون الرئيسي للجهاز تحلل باستخدام تقنيات الطباعة بصفائح معدة ضوئيا ميكروفلويديك القياسية مع المعدات في جامعة لويزفيل غرف الأبحاث [1]. وقد استخدم أوتوكاد (أوتوديسك ، وشركة ، وسان ?...

<ol>
	<li>White, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+application+of+microfluidic+leukocyte+enrichment+protocol+in+mild+phenotype+sickle+cell+disease+(SCD.">Clinical application of microfluidic leukocyte enrichment protocol in mild phenotype sickle cell disease (SCD.</a> Biomedical Microdevices. 11 (2), 477-483 (2009).</li><li>Sethu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+Flow+Microfluidic+Device+for+Rapid+Erythrocyte+Lysis.">Continuous Flow Microfluidic Device for Rapid Erythrocyte Lysis.</a> Anal. Chem. 76 (21), 6247-6253 (2004).</li></ol>

وقد افاد الآلي تحلل الدم ميكروفلويديك البروتوكول. ضمن البروتوكول هي الخطوات الحاسمة الجدير بالذكر. في القسم P.2.1 ، فمن المهم أن تجاهل فيال الدم الاولى التي جمعت وكانت العينة تحتوي على خلايا بطانية ناضجة فكها بوصفها ايجابيات كاذبة. أيضا التأكد من تشغيل عينة من الدم في ?...

automated microfluidic blood lysis protocol for enrichment of circulating nucleated cells

في هذا التقرير هو مفصل في البروتوكول الآلي للحصول على جهاز ميكروفلويديك الدم تحلل. تعميم خلايا الأنوية (CNCs) ، بما في الكريات البيضاء وخلايا بطانة الأوعية الدموية ، وتوفير منصة مثالية للحصول على وضع محدثة عن حالة المناعي للفرد. بروتوكول ميكروفلويديك يسمح لتخصيب CNCs دون فقدان الخلية عينة انتقائية وتقلب بسبب إعداد المستخدم بوساطة الخطوات. لفترة وجيزة ، ويتضمن البروتوكول تصنيع الجهاز ، وجمع العينات ، إعداد الجهاز ، وتشغيل الدم من خلال غرفة ميكروفلويديك. داخل الجهاز هو مختلط الدم بسرعة كاملة مع الماء منزوع الأيونات لنحو 10 ثانية في 50 ميكرون × 150 قناة ميكروفلويديك ميكرون. في هذا الوقت هي lysed الكريات الحمراء تمتد بسبب ظروف ناقص التوتر. هياكل متعرجة على الجزء السفلي من القناة ضمان خلط دقيق والتعرض للخلايا في بيئة ثابتة. يتم إرجاع الخلايا المتبقية لظروف متساوي التوتر في الخروج من الجهاز ، باستخدام بارافورمالدهيد ثابتة 2 ٪ ، وطرد لفصل كرات الدم الحمراء من الحطام CNCs ، وعلقت في تدفق العازلة للتلوين وتحليلها من جانب التدفق الخلوي. تظهر النتائج نظيفة المؤامرات مبعثر تدفق الخلوي مع السكان CNC المحفوظة. أهمية هذا الجهاز والبروتوكول يأتي في دراسة وفهم الأمراض المرضية عن طريق التحليل للسكان باستخدام الحاسب الآلي. وبالتالي ، فإن تظاهر الأتمتة والفعالية والبساطة للبروتوكول ميكروفلويديك.

Watch this Scientific Journal Video about Automated Microfluidic Blood Lysis Protocol for Enrichment of Circulating Nucleated Cells at JoVE.com

Automated Microfluidic Blood Lysis Protocol for Enrichment of Circulating Nucleated Cells

وقد تم تطوير جهاز ميكروفلويديك الآلي لتعميم الأنوية تخصيب الخلية من الدم المحيطي عبر تحلل كرات الدم الحمراء التي تضمن عزل عينة ذات جودة عالية من دون خسارة الخلية.

تحلل الدم ميكروفلويديك الآلي بروتوكول لتخصيب اعارة خلايا الأنوية

In this report the protocol for an automated microfluidic blood lysis device is detailed. Circulating nucleated cells (CNCs), including leukocytes and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies

تخصيب خلايا NK من دم الانسان مع مجموعة من تقنيات RosetteSep StemCell

Natural killer (NK) cells are large granular cytotoxic lymphocytes that belong to the innate immune system and play major roles in fighting against cancer ...

Microfluidic Applications for Disposable Diagnostics

ميكروفلويديك طلبات للحصول على تشخيص احدة

In this interview, Dr. Klapperich discusses the fabrication of thermoplastic microfluidic devices and their application for development of new ...

Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions

ميكروفلويديك المشارك ثقافة الخلايا الظهارية والبكتيريا للتحقيق في ذوبان الإشارات بوساطة التفاعلات

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria coexist. It has ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

العزلة والثقافة في الخلايا البطانية الرئوي من الفئران حديثي الولادة

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Generation and Culture of Blood Outgrowth Endothelial Cells from Human Peripheral Blood

جيل وثقافة الدم ثمرة غشائي خلايا من الدم المحيطي الإنسان

Historically, the limited availability of primary endothelial cells from patients with vascular disorders has hindered the study of the molecular ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

البروتينات التحليل المناعي من الداخلية والخارجية السنترومير-الحيز الحركي

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

Using Microfluidic Devices to Measure Lifespan and Cellular Phenotypes in Single Budding Yeast Cells

استخدام أجهزة ميكروفلويديك لقياس عمر والخلوية الظواهر في خلايا الخميرة في مهدها واحدة

Budding yeast Saccharomyces cerevisiae is an important model organism in aging research. Genetic studies have revealed many genes with conserved effects ...

A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

بروتوكول الآلي السريع لالعضلات تحليل الألياف السكان في الجرذ العضلات المقاطع العرضية عن طريق سلسلة الميوسين الثقيلة المناعية

Quantification of muscle fiber populations provides a deeper insight into the effects of disease, trauma, and various other influences on skeletal muscle ...

A Protocol for Using Gene Set Enrichment Analysis to Identify the Appropriate Animal Model for Translational Research

تعيين بروتوكول لاستخدام الجينات إثراء التحليل لتحديد نموذج الحيوان المناسب للبحوث متعدية

Recent studies that compared transcriptomic datasets of human diseases with datasets from mouse models using traditional gene-to-gene comparison ...

Isolation of CD4+ T-cells and Analysis of Circulating T-follicular Helper (cTfh) Cell Subsets from Peripheral Blood Using 6-color Flow Cytometry

Isolation of CD4+ T-cells and Analysis of Circulating T-follicular Helper cTfh Cell Subsets from Peripheral Blood Using 6-color Flow Cytometry

عزل خلايا CD4+ خلايا تي و "تحليل لتعميم" مساعد تي الحبيبي (كتفه) "خلية مجموعات فرعية" من 6-لون "الدم الطرفية استخدام التدفق الخلوي"

Aberrant T-follicular helper (Tfh) cell activity is detectable in autoimmune conditions and their presence is associated with clinical outcomes when the ...