Name: obtaining hemocytes from the hawaiian bobtail squid euprymna scolopes and observing their adherence to symbiotic and non-symbiotic bacteria
Uploaded: 2010-02-11T04:52:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria at JoVE.com

Financieringsbronnen: University of Connecticut Research Foundation en het ministerie van Moleculaire en Cellulaire Biologie aan SVN, Sigma Xi Grant-in-Aid-van onderzoek en Antonio H. en R. Majorie Romano Graduate Education Fellowship voor AJC

<ol><li> Bereid 500 ml van 0,22 um filter gesteriliseerde kunstmatig zeewater (FSW, zoutgehalte 35 ppt). Filter kunstmatige of natuurlijke zeewater door een 0,22 um micron filter om deeltjes en bacteriën te verwijderen. </li><li> Verdoven een volwassen Hawaiian bobtail squid (Euprymna scolopes) door plaatsing in een 2% oplossing van ethanol in FSW. Plaats het dier in narcose voor ongeveer 10 minuten. De inktvis zal ophouden te zwemmen en zal niet actief inspelen op te raken. Vervolg ademhaling, aangegeven door beweging van de mantel, ...

<ol>
	<li>Koropatnick, T. A., Kimbell, J. R., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+host+hemocytes+during+the+initiation+of+the+squid-Vibrio+symbiosis.">Responses of host hemocytes during the initiation of the squid-Vibrio symbiosis.</a> Biol. Bull. 212, 29-39 (2007).</li><li>McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unseen+forces:+the+influence+of+bacteria+on+animal+development.">Unseen forces: the influence of bacteria on animal development.</a> Dev. Biol. 242, 1-14 (2002).</li><li>McFall-Ngai, M. J., Ruby, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symbiont+recognition+and+subsequent+morphogenesis+as+early+events+in+an+animal-bacterial+mutualism.">Symbiont recognition and subsequent morphogenesis as early events in an animal-bacterial mutualism.</a> Science. 254, 1491-1494 (1991).</li><li>Nyholm, S. V., Stewart, J. J., Ruby, E. G., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+between+symbiotic+Vibrio+fischeri+and+the+haemocytes+of+Euprymna+scolopes.">Recognition between symbiotic Vibrio fischeri and the haemocytes of Euprymna scolopes.</a> Environ. Microbiol. 11, 483-493 (2009).</li><li>Nyholm, S. V., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+winnowing:+establishing+the+squid-Vibrio+symbiosis.">The winnowing: establishing the squid-Vibrio symbiosis.</a> Nat. Rev. Microbiol. 2, 632-642 (2004).</li><li>Nyholm, S. V., Stabb, E. V., Ruby, E. G., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+an+animal-bacterial+association:+recruiting+symbiotic+Vibrios+from+the+environment.">Establishment of an animal-bacterial association: recruiting symbiotic Vibrios from the environment.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 97, 10231-10235 (2000).</li><li>Nyholm, S. V., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+the+light-organ+microenvironment+of+Euprymna+scolopes:+description+of+a+population+of+host+cells+in+association+with+the+bacterial+symbiont+Vibrio+fischeri.">Sampling the light-organ microenvironment of Euprymna scolopes: description of a population of host cells in association with the bacterial symbiont Vibrio fischeri.</a> Biol Bull. 195, 89-97 (1998).</li><li>Visick, K. L., Ruby, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vibrio+fischeri+and+its+host:+it+takes+two+to+tango.">Vibrio fischeri and its host: it takes two to tango.</a> Curr. Opin. Microbiol. 9, 632-638 (2006).</li></ol>

Onderzoek naar de rol van het immuunsysteem in het bemiddelen moleculaire signalering tussen de heilzame bacteriën en hun gastheer hebben in de afgelopen jaren belangrijke bijdragen geleverd aan ons begrip van de co-evolutie van eukaryoten met hun microbiota. Het squid / Vibrio-systeem heeft zich bewezen als een soepel model systeem om fundamentele vragen op dit gebied 2,3,5,6,8 te beantwoorden. Het licht-orgel van de inktvis Euprymna scolopes vergunningen kolonisatie uitsluitend door de lichtgevend...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Lab-Tek chambered #1.0 borosilicate coverglass system (8-chambers)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo-Fisher Scientific</td>
<td>155411</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>26.5 G 1ml latex-free insulin syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton, Dickinson and Company</td>
<td>C34551</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell Tracker Orange</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>C34551</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SteREO Discovery V20 Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SP2 Confocal Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

obtaining hemocytes from the hawaiian bobtail squid euprymna scolopes and observing their adherence to symbiotic and non-symbiotic bacteria

Onderzoek naar de rol van het immuunsysteem in het bemiddelen moleculaire signalering tussen de heilzame bacteriën en hun gastheer hebben in de afgelopen jaren belangrijke bijdragen geleverd aan ons begrip van de co-evolutie van eukaryoten met hun microbiota. De symbiotische relatie tussen de Hawaiiaanse Bobtail inktvis,<em&gt; Euprymna scolopes</em&gt; En de lichtgevende bacterie<em&gt; Vibrio fischeri</em&gt; Is gebruikt als een modelsysteem voor het begrijpen van de effecten van gunstige bacteriën op dierlijke ontwikkeling. Recente studies hebben aangetoond dat macrofagen-achtige hemocytes, de enige cellulaire component van aangeboren de inktvis gastheer immuunsysteem van waarschijnlijker, een belangrijke rol spelen in het mediëren van de oprichting en het onderhoud van deze vereniging. Dit protocol zal demonstreren hoe hemocytes te verkrijgen van<em&gt; E. scolopes</em&gt; En vervolgens gebruik maken van deze cellen in bacteriële bindingstesten. Volwassen inktvis worden eerst verdoofd voordat hemolymfe wordt verzameld door spuit van de belangrijkste cefalische bloedvat. De gastheer hemocytes, vervat in de geëxtraheerde hemolymfe, in acht worden genomen chambered dekglaasjes en vervolgens blootgesteld aan green fluorescent protein-gelabeld symbiotische<em&gt; Vibrio fischeri</em&gt; En niet-symbiotische<em&gt; Vibrio harveyi</em&gt;. De hemocytes zijn tegengekleurd met een fluorescerende kleurstof (Cell Tracker Orange, Invitrogen) en vervolgens gevisualiseerd met behulp van fluorescentie microscopie.

Watch this Scientific Journal Video about Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria at JoVE.com

Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria

Deze video zal laten zien hoe je hemocytes (bloedcellen) te verkrijgen van de Hawaiiaanse Bobtail inktvis,<em&gt; Euprymna scolopes</em&gt; Voor gebruik in de celbiologische en bacteriële hechting testen. Hemocytes wordt gekleurd met een fluorescerende kleurstof en blootgesteld aan GFP-gemerkte bacteriën.

Het verkrijgen van Hemocytes van de Hawaiiaanse Bobtail Squid Euprymna scolopes En observatie van de Naleving van Symbiotische en niet-symbiotische bacteriën

Studies concerning the role of the immune system in mediating molecular signaling between beneficial bacteria and their hosts have, in recent years, made ...

Research

JoVE Journal

Biology

Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

Het verkrijgen van Eieren van Xenopus laevis Teven

The eggs of Xenopus laevis intact, lysed, and/or fractionated are useful for a wide variety of experiments. This protocol shows how to induce egg laying, ...

Obtaining High Quality RNA from Single Cell Populations in Human Postmortem Brain Tissue

Het verkrijgen van hoge kwaliteit-RNA van Single celpopulaties in Human postmortaal hersenweefsel

We proposed to investigate the gray matter reduction in the superior temporal gyrus seen in schizophrenia patients, by interrogating gene expression ...

Formulations for Freeze-drying of Bacteria and Their Influence on Cell Survival

Formuleringen voor Vriesdrogen van bacteriën en hun invloed op de overleving van de cel

Cellular water can be removed to reversibly inactivate microorganisms to facilitate storage. One such method of removal is freeze-drying, which is ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

Een eenvoudig protocol voor het extraheren van hemocyten van Wild Rupsen

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Isolatie en Cultuur van individuele myovezels en hun satelliet cellen van volwassen skeletspier

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

Collection, Isolatie en Verrijking van natuurlijk voorkomende Magnetotactic Bacteriën van het milieu

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

Het verkrijgen van exemplaren met vertraagd, versneld en Reversed Aging in de Honey Bee Model

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

A Method for Extracting Pigments from Squid Doryteuthis pealeii

A Method for Extracting Pigments from Squid Doryteuthis pealeii

Een methode voor het extraheren Pigmenten van Squid<em&gt; Doryteuthis pealeii</em

Cephalopods can undergo rapid and adaptive changes in dermal coloration for sensing, communication, defense, and reproduction purposes. These capabilities ...

Split Green Fluorescent Protein System to Visualize Effectors Delivered from Bacteria During Infection

Split groen Fluorescent proteïne systeem te visualiseren effectoren verlost van bacteriën tijdens de infectie

Bacteria, one of the most important causative agents of various plant diseases, secrete a set of effector proteins into the host plant cell to subvert the ...

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolatie van hoogwaardige murine atriale en ventriculaire myocyten voor gelijktijdige metingen van Ca2+ transiënten en L-type calciumstroom

Mouse models play a crucial role in arrhythmia research and allow studying key mechanisms of arrhythmogenesis including altered ion channel function and ...