Name: obtaining hemocytes from the hawaiian bobtail squid euprymna scolopes and observing their adherence to symbiotic and non-symbiotic bacteria
Uploaded: 2010-02-11T04:52:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria at JoVE.com

Finanzierungsquellen: University of Connecticut Research Foundation und dem Department of Molecular and Cell Biology an SVN, Sigma Xi Grant-in-Aid-Forschung und Antonio H. und R. Majorie Romano Graduate Education Fellowship zu AJC

<ol><li> Bereiten Sie 500 ml 0,22 um Filter-sterilisiert künstlichem Meerwasser (FSW; Salzgehalt 35 ppt). Filter künstlichen oder natürlichen Meerwasser durch ein 0,22 um-Mikron-Filter zur Entfernung von Partikeln und Bakterien. </li><li> Anesthetize einen Erwachsenen Hawaiian Bobtail Squid (Euprymna scolopes), indem Sie in eine 2% ige Lösung von Ethanol in FSW. Legen Sie das Tier in Narkose für etwa 10 Minuten. Der Tintenfisch wird aufhören Schwimmen und sich nicht aktiv auf Berührung reagieren. Fortsetzung Atmung, angegeben du...

<ol>
	<li>Koropatnick, T. A., Kimbell, J. R., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+host+hemocytes+during+the+initiation+of+the+squid-Vibrio+symbiosis.">Responses of host hemocytes during the initiation of the squid-Vibrio symbiosis.</a> Biol. Bull. 212, 29-39 (2007).</li><li>McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unseen+forces:+the+influence+of+bacteria+on+animal+development.">Unseen forces: the influence of bacteria on animal development.</a> Dev. Biol. 242, 1-14 (2002).</li><li>McFall-Ngai, M. J., Ruby, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symbiont+recognition+and+subsequent+morphogenesis+as+early+events+in+an+animal-bacterial+mutualism.">Symbiont recognition and subsequent morphogenesis as early events in an animal-bacterial mutualism.</a> Science. 254, 1491-1494 (1991).</li><li>Nyholm, S. V., Stewart, J. J., Ruby, E. G., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+between+symbiotic+Vibrio+fischeri+and+the+haemocytes+of+Euprymna+scolopes.">Recognition between symbiotic Vibrio fischeri and the haemocytes of Euprymna scolopes.</a> Environ. Microbiol. 11, 483-493 (2009).</li><li>Nyholm, S. V., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+winnowing:+establishing+the+squid-Vibrio+symbiosis.">The winnowing: establishing the squid-Vibrio symbiosis.</a> Nat. Rev. Microbiol. 2, 632-642 (2004).</li><li>Nyholm, S. V., Stabb, E. V., Ruby, E. G., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+an+animal-bacterial+association:+recruiting+symbiotic+Vibrios+from+the+environment.">Establishment of an animal-bacterial association: recruiting symbiotic Vibrios from the environment.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 97, 10231-10235 (2000).</li><li>Nyholm, S. V., McFall-Ngai, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+the+light-organ+microenvironment+of+Euprymna+scolopes:+description+of+a+population+of+host+cells+in+association+with+the+bacterial+symbiont+Vibrio+fischeri.">Sampling the light-organ microenvironment of Euprymna scolopes: description of a population of host cells in association with the bacterial symbiont Vibrio fischeri.</a> Biol Bull. 195, 89-97 (1998).</li><li>Visick, K. L., Ruby, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vibrio+fischeri+and+its+host:+it+takes+two+to+tango.">Vibrio fischeri and its host: it takes two to tango.</a> Curr. Opin. Microbiol. 9, 632-638 (2006).</li></ol>

Studien über die Rolle des Immunsystems bei der Vermittlung von molekularen Signale zwischen nützlichen Bakterien und ihren Wirten haben, in den letzten Jahren bedeutende Beiträge zu unserem Verständnis der Ko-Evolution von Eukaryonten mit ihrer Mikroflora. Der squid / vibrio System hat sich als gefügig Modellsystem, um grundsätzliche Fragen in diesem Bereich 2,3,5,6,8 beantworten bewährt. Das Licht-Orgel des Tintenfisches Euprymna scolopes erlaubt Kolonisierung ausschließlich durch die leuch...

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		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Lab-Tek chambered #1.0 borosilicate coverglass system (8-chambers)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo-Fisher Scientific</td>
<td>155411</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>26.5 G 1ml latex-free insulin syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton, Dickinson and Company</td>
<td>C34551</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell Tracker Orange</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>C34551</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SteREO Discovery V20 Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SP2 Confocal Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

obtaining hemocytes from the hawaiian bobtail squid euprymna scolopes and observing their adherence to symbiotic and non-symbiotic bacteria

Studien über die Rolle des Immunsystems bei der Vermittlung von molekularen Signale zwischen nützlichen Bakterien und ihren Wirten haben, in den letzten Jahren bedeutende Beiträge zu unserem Verständnis der Ko-Evolution von Eukaryonten mit ihrer Mikroflora. Die symbiotische Beziehung zwischen den Hawaii-Bobtail Tintenfisch,<em&gt; Euprymna scolopes</em&gt; Und die Biolumineszenz Bakterium<em&gt; Vibrio fischeri</em&gt; Hat als Modellsystem für das Verständnis der Auswirkungen von nützlichen Bakterien auf tierische Entwicklung genutzt. Jüngste Studien haben gezeigt, dass Makrophagen-ähnliche Blutzellen, die einzige zelluläre Komponente des Tintenfisches Host angeborenen Immunsystems, die wahrscheinlich eine wichtige Rolle spielen bei der Vermittlung der Einrichtung und Unterhaltung des Vereins. Dieses Protokoll wird zeigen, wie Blutzellen erhalten Sie bei<em&gt; E. scolopes</em&gt; Und verwenden Sie dann diese Zellen in bakteriellen Bindungsassays. Adult Tintenfische sind zunächst betäubt, bevor Hämolymphe wird mit einer Spritze von der Hauptstraße cephalica Blutgefäß gesammelt. Der Gastgeber Blutzellen, in der extrahierten Hämolymphe enthalten sind, zu chambered Deckgläser aufgeklebt und dann auf grün fluoreszierende Protein-markierten symbiotische ausgesetzt<em&gt; Vibrio fischeri</em&gt; Und nicht-symbiotische<em&gt; Vibrio harveyi</em&gt;. Die Blutzellen werden mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Cell Tracker Orange, Invitrogen) gegengefärbt und anschließend visualisiert Fluoreszenz-Mikroskopie.

Watch this Scientific Journal Video about Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria at JoVE.com

Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria

Dieses Video wird zeigen, wie Blutzellen (Blutkörperchen) aus dem hawaiianischen Bobtail Squid zu erreichen,<em&gt; Euprymna scolopes</em&gt; Für den Einsatz in zellbiologischen und bakterielle Adhäsion Assays. Blutzellen wird mit einem Fluoreszenzfarbstoff angefärbt werden und ausgesetzt GFP-markierten Bakterien.

Beziehen Blutzellen aus dem hawaiianischen Bobtail Squid Euprymna scolopes Und die Beobachtung ihrer Einhaltung Symbiotic und Non-symbiotischen Bakterien

Studies concerning the role of the immune system in mediating molecular signaling between beneficial bacteria and their hosts have, in recent years, made ...

Research

JoVE Journal

Biology

Obtaining Hemocytes from the Hawaiian Bobtail Squid Euprymna scolopes and Observing their Adherence to Symbiotic and Non-Symbiotic Bacteria

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

Beziehen Eier von Xenopus laevis Weibchen

The eggs of Xenopus laevis intact, lysed, and/or fractionated are useful for a wide variety of experiments. This protocol shows how to induce egg laying, ...

Forschung

Biologie

Obtaining High Quality RNA from Single Cell Populations in Human Postmortem Brain Tissue

Beziehen High Quality-RNA aus Einzel-Zellpopulationen in menschlichen Postmortem Gehirngewebe

We proposed to investigate the gray matter reduction in the superior temporal gyrus seen in schizophrenia patients, by interrogating gene expression ...

Formulations for Freeze-drying of Bacteria and Their Influence on Cell Survival

Formulierungen für die Gefriertrocknung von Bakterien und deren Einfluss auf Zellebensdauer

Cellular water can be removed to reversibly inactivate microorganisms to facilitate storage. One such method of removal is freeze-drying, which is ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

A Simple Protocol für das Extrahieren Hämozyten von Wild Caterpillars

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Isolation und Kultur der einzelnen Muskelfasern und ihre Satelliten aus adulten Skelettmuskel

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

Collection, Isolierung und Anreicherung von natürlich vorkommenden Magnetotaktische Bakterien aus der Umwelt

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

Beziehen Proben mit verlangsamt, Beschleunigte und Umge Aging in der Honig-Bienen-Modell

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

A Method for Extracting Pigments from Squid Doryteuthis pealeii

A Method for Extracting Pigments from Squid Doryteuthis pealeii

Ein Verfahren zum Extrahieren Pigmente aus Squid<em&gt; Doryteuthis pealeii</em

Cephalopods can undergo rapid and adaptive changes in dermal coloration for sensing, communication, defense, and reproduction purposes. These capabilities ...

Split Green Fluorescent Protein System to Visualize Effectors Delivered from Bacteria During Infection

Split-grün fluoreszierendes Protein System Effektoren geliefert von Bakterien während der Infektion zu visualisieren

Bacteria, one of the most important causative agents of various plant diseases, secrete a set of effector proteins into the host plant cell to subvert the ...

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolierung von hochwertigen atrialen und ventrikulären Myozyten der Maus für die simultane Messung von Ca2+ Transienten und L-Typ Calciumstrom

Mouse models play a crucial role in arrhythmia research and allow studying key mechanisms of arrhythmogenesis including altered ion channel function and ...