Name: optimized fibrin gel bead assay for the study of angiogenesis
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis at JoVE.com

<p class="jove_step"> 준비 CELLS </p><ol><li> FBS / 펜 - Strep (1:100) 1~2일 구슬선 전에 M199/10 %에 HUVEC와 섬유아 세포를 가져와. </li><li> 섬유아 세포에 대한 퍼가기 전에 HUVEC와 하루 구슬 장식하기 전에 EGM - 2 (Clonetics) 하루 매체를 전환합니다. </li><li> ~ 400 HUVEC 당 비드의 농도가 필요합니다. </li><li> 물론 당 20,000 섬유아 세포이 필요합니다. </li></ol><p class="jove_step"> HUVEC있는 비즈 코팅 - DAY -1 </p><ol><li> HUVEC을 Trypsinize. </li><li> (원심 ?...

<ol>
	<li>Nehls, V., Drenckhahn, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microcarrier-based+cocultivation+system+for+the+investigation+of+factors+and+cells+involved+in+angiogenesis+in+three-dimensional+fibrin+matrices+in+vitro.">A microcarrier-based cocultivation system for the investigation of factors and cells involved in angiogenesis in three-dimensional fibrin matrices in vitro.</a> <em style='font-style: italic'>Histochem Cell Biol</em>. <b>104</b>, 459-466 (1995).</li><li>Nehls, V., Drenckhahn, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel,+microcarrier-based+in+vitro+assay+for+rapid+and+reliable+quantification+of+three-dimensional+cell+migration+and+angiogenesis.">A novel, microcarrier-based in vitro assay for rapid and reliable quantification of three-dimensional cell migration and angiogenesis.</a> <em style='font-style: italic'>Microvasc Res</em>. <b>50</b>, 311-322 (1995).</li></ol>

<p> 시험 관내 angiogenesis의 assays에서 (3D) 입체은 2D 문화를 사용하여 얻을 수있는 것보다 생체내의 실제 환경에 훨씬 가까운 모델을 제공 강력히 주장하고있다. 그것은 우수한 3D 시스템은 재현성 수 있으며, angiogenesis의 주요 단계의 몇몇을 모방 수있을 것이 분명합니다. 몇 가지 이전 3D assays가 개발되었습니다 있지만, 이러한 많은도 microvascular 세포를 얻기 위해 열심히 사용, 아니면 단계의 일부를 요점을 되풀이하다....

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Cytodex-3 Beads</td>
<td>Reagent</td>
<td>Amersham Pharmacia</td>
<td>17-0485-01</td>
<td>10 g/bottle. 
1.	0.5 g of dry beads are hydrated and swollen in 50 mL PBS (pH=7.4) for at least 3 hours at RT.
Use a 50 mL tube and place it on the rocker.
2.	Let the beads settle down (~ 15 min). Discard the supernatant and wash the beads for a few minutes in fresh PBS (50 mL).
3.	Discard the PBS and replace with fresh PBS:
25 mL -> 20 mg/mL => 60000 beads/mL or
50 mL -> 10 mg/mL => 30000 beads/ mL
4.	Place the bead suspension in a siliconized glass bottle (Windshield Wiper or Sigmacote).
5.	Sterilize the beads by autoclaving for 15 min at 115&#xF0B0;C.
6.	Store it at 4&#xF0B0;C.
</td>
</tr>
<tr>
<td>Aprotinin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-1153</td>
<td>10mg/bottle. Reconstitute lyophilized aprotinin at 4 U/mL in DI water. Sterile filter. Make aliquots of 1 mL each. Store at -20C.
</td>
</tr>
<tr>
<td>Fibrinogen Type I</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>F-8630</td>
<td>1g. Dissolve 2 mg/mL fibrinogen in DPBS
Note clottable protein % and adjust accordingly 
Heat in a 37&#xF0B0;C-water bath to dissolve the fibrinogen. Mix by inverting the tube. Do not vortex.
Sterile filter through 0.22 um
</td>
</tr>
<tr>
<td>Thrombin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>T-3399</td>
<td>22 mg=1000 units. Reconstitute in sterile water at 50 U/mL. Make aliquots of 0.5 mL each. Store at -20C.
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

optimized fibrin gel bead assay for the study of angiogenesis

<p class="jove_content">Angiogenesis는 angiogenic 자극에 대응, 새로운 선박은 기존 vasculature에서 만들어지는 복잡한 다단계 프로세스입니다. 이러한 단계는 다음과 같습니다 세포외 기질, 코드로 EC의 정렬에 내피 세포의 지하 막, 증식 및 마이 그 레이션 (돋아) (EC)의 저하, 분기, 루멘 형성, 문합, 새로운 지하 막 형성합니다. 시험 관내 assays의 많은이 과정을 연구하기 위해 개발하지만, 대부분의 전용 angiogenesis의 특정 단계를 모방하고, morphologically assays 내에 혈관이 자주 생체내에서 선박과 유사하지되었습니다. Nehls 및 Drenckhahn로 이전 작업을 바탕으로, 우리는 인간 제대 정맥 EC와 섬유아 세포를 이용 체외의 angiogenesis 분석에 최적화했습니다. 이 모델 recapitulates는 angiogenesis의 핵심 초기 단계의 모든하고, 중요한 혈관 편광 EC 둘러싸인 세포 특허 루멘을 표시합니다. EC는 cytodex의 microcarriers에 코팅 및 섬유소 젤에 포함됩니다. 섬유아 세포들은 EC의 구슬의 표면에서 돋아 촉진 필요한 가용성 요소를 제공하는 젤 위에 계층입니다. 며칠 후, 수많은 혈관은 쉽게 위상 대조 및 시간 경과 현미경 하에서 관찰 수있는 선물입니다. 이 동영상이 문화를 설정의 주요 단계를 보여줍니다.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis at JoVE.com

Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis

<p class="jove_content">이 동영상은 체외의 angiogenesis 분석에의 프로토콜을 보여줍니다 angiogenesis의 recapitulates 여러 단계의 것을. 시간 저속 돋아의 이미지, 루멘 형성, 분기 및 문합 - angiogenesis의 주요 기능은 - 표시됩니다.</p>

Angiogenesis 연구에 최적화된 섬유소 젤 비드 분석

Angiogenesis is a complex multi-step process, where, in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature.  These ...

Research

JoVE Journal

Biology

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

도마뱀의 운동의 속도와 방향에 시각 민감도 테스트

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

연구

생물학

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis (Interview)

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis Interview

크리스토퍼 휴즈 : Angiogenesis 연구를위한 체외 모델 (인터뷰)

Christopher C.W. Hughes describes the utility of his culture system for studying angiogenesis in vitro.  He explains the importance of fibroblasts that ...

Computer-Generated Animal Model Stimuli

컴퓨터가 만든 동물 모델 자극

Communication between animals is diverse and complex. Animals may communicate using auditory, seismic, chemosensory, electrical, or visual signals. In ...

Isolation and Purification of <em>Drosophila</em> Peripheral Neurons by Magnetic Bead Sorting

Isolation and Purification of Drosophila Peripheral Neurons by Magnetic Bead Sorting

의 분리 및 정제<em> Drosophila</em마그네틱 비드별로 정렬> 주변 뉴런

The Drosophila peripheral nervous system (PNS) is a powerful model for investigating the complex processes of neuronal development and dendrite ...

Rat Mesentery Angiogenesis Assay

쥐 장간막의 Angiogenesis 분석

The adult rat mesentery window angiogenesis assay is biologically appropriate and is exceptionally well suited to the 
study of sprouting angiogenesis in ...

Endothelial Cell Tube Formation Assay for the <em>In Vitro</em> Study of Angiogenesis

Endothelial Cell Tube Formation Assay for the In Vitro Study of Angiogenesis

에 대한 내피 세포의 관 형성의 분석<em&gt; 체외</em&gt; 혈관 신생 연구

Angiogenesis is a vital process for normal tissue development and wound healing, but is also associated with a variety of pathological conditions. Using ...

A Simple Bioassay for the Evaluation of Vascular Endothelial Growth Factors

혈관 내피 성장 인자의 평가에 대한 간단한 생물 검정

The analysis of receptor tyrosine kinases and their interacting ligands involved in vascular biology is often challenging due to the constitutive ...

<em>In Vivo</em> Study of Human Endothelial-Pericyte Interaction Using the Matrix Gel Plug Assay in Mouse

In Vivo Study of Human Endothelial-Pericyte Interaction Using the Matrix Gel Plug Assay in Mouse

마우스의 매트릭스 젤 플러그 분석을 사용하여 인간의 내피 - 주연 세포 상호 작용의 <em>생체 내 연구에</em>

Angiogenesis is the process by which new blood vessels are formed from existing vessels. New vessel growth requires coordinated endothelial cell ...

An Ex Vivo Choroid Sprouting Assay of Ocular Microvascular Angiogenesis

안구 미세 혈관 신생의 전 비보 코로이드 발아 분석

Pathological choroidal angiogenesis, a salient feature of age-related macular degeneration, leads to vision impairment and blindness. Endothelial cell ...

Simplifying angiogenesis studies with a modified matrix gel plug assay(수정된 매트릭스 겔 플러그 어세이를 통한 혈관신생 연구 간소화)

Modified <em>In Vivo</em> Matrix Gel Plug Assay for Angiogenesis Studies

저자 스포트라이트: Investigating Angiogenesis and Vessel Permeability Through a Modified Matrix Gel Plug Assay (수정된 매트릭스 겔 플러그 분석을 통한 혈관신생 및 혈관 투과성 조사)

혈관신생 연구를 위한 <em>수정된 In Vivo</em> Matrix Gel Plug Assay

Several models have been developed to investigate angiogenesis in vivo. However, most of these models are complex and expensive, require specialized ...