Name: preparation of oligomeric &beta;-amyloid1-42 and induction of synaptic plasticity impairment on hippocampal slices
Uploaded: 2010-07-14T17:30:00
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इस काम स्नायविक विकारों और स्ट्रोक के NIH राष्ट्रीय संस्थान (NINDS) (NS049442) द्वारा समर्थित किया गया.&gt;

Resuspending पेप्टाइड β-amyloid पहले शुरू हो रही तैयार है: <ul><li> Aβ 1-42 (lyophilized पाउडर) </li><li> 1,1,1,3,3,3 - Hexafluoro-2-propanol (HFIP) </li><li> कम बाध्यकारी polypropylene microcentrifuge ट्यूबों (1.5 मिलीलीटर) </li><li> Teflon उतर रोक (250 μl) के साथ GasTight हैमिल्टन सिरिंज </li><li> Dimethylsul...

<ol>
	<li>Stine, W. B., Dahlgren, K. N., Krafft, G. A., LaDu, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+characterization+of+conditions+for+amyloid-beta+peptide+oligomerization+and+fibrillogenesis.">In vitro characterization of conditions for amyloid-beta peptide oligomerization and fibrillogenesis.</a> J Biol Chem. 278, 11612-11622 (2003).</li><li>Vitolo, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+beta+-peptide+inhibition+of+the+PKA/CREB+pathway+and+long-term+potentiation:+reversibility+by+drugs+that+enhance+cAMP+signaling.">Amyloid beta -peptide inhibition of the PKA/CREB pathway and long-term potentiation: reversibility by drugs that enhance cAMP signaling.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 13217-13221 (2002).</li><li>Puzzo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Picomolar+amyloid-beta+positively+modulates+synaptic+plasticity+and+memory+in+hippocampus.">Picomolar amyloid-beta positively modulates synaptic plasticity and memory in hippocampus.</a> J Neurosci. 28, 14537-14545 (2008).</li><li>Lewczuk, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+sample+collection+tubes+on+cerebrospinal+fluid+concentrations+of+tau+proteins+and+amyloid+beta+peptides.">Effect of sample collection tubes on cerebrospinal fluid concentrations of tau proteins and amyloid beta peptides.</a> Clin Chem. 52, 332-334 (2006).</li><li>Masliah, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+synaptic+dysfunction+in+Alzheimer's+disease.">Mechanisms of synaptic dysfunction in Alzheimer's disease.</a> Histol Histopathol. 10, 509-519 (1995).</li><li>Cullen, W. K., Suh, Y. H., Anwyl, R., Rowan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Block+of+LTP+in+rat+hippocampus+in+vivo+by+beta-amyloid+precursor+protein+fragments.">Block of LTP in rat hippocampus in vivo by beta-amyloid precursor protein fragments.</a> Neuroreport. 8, 3213-3217 (1997).</li><li>Itoh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impairments+of+long-term+potentiation+in+hippocampal+slices+of+beta-amyloid-infused+rats.">Impairments of long-term potentiation in hippocampal slices of beta-amyloid-infused rats.</a> Eur J Pharmacol. 382, 167-175 (1999).</li><li>Walsh, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naturally+secreted+oligomers+of+amyloid+beta+protein+potently+inhibit+hippocampal+long-term+potentiation+in+vivo.">Naturally secreted oligomers of amyloid beta protein potently inhibit hippocampal long-term potentiation in vivo.</a> Nature. 416, 535-539 (2002).</li><li>Lambert, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=nonfibrillar+ligands+derived+from+Abeta1-42+are+potent+central+nervous+system+neurotoxins.">nonfibrillar ligands derived from Abeta1-42 are potent central nervous system neurotoxins.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 6448-6453 (1998).</li><li>Gong, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ubiquitin+hydrolase+Uch-L1+rescues+beta-amyloid-induced+decreases+in+synaptic+function+and+contextual+memory.">Ubiquitin hydrolase Uch-L1 rescues beta-amyloid-induced decreases in synaptic function and contextual memory.</a> Cell. 126, 775-788 (2006).</li><li>Trinchese, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+calpains+improves+memory+and+synaptic+transmission+in+a+mouse+model+of+Alzheimer+disease.">Inhibition of calpains improves memory and synaptic transmission in a mouse model of Alzheimer disease.</a> J Clin Invest. 118, 2796-2807 (2008).</li></ol>

जैसा कि ऊपर वर्णित है, oligomeric Aβ की तैयारी में कई समस्याओं अछूता LTP में परिणाम कर सकते हैं. एक ही रास्ता करने के लिए मूल्यांकन कि Aβ गिरावट या Aβ oligomerization की कमी हुई हो सकती है है Aβ Tris Tricine PAGE / पश्चिमी सोख्ता विश्लेषण और...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>A&beta; 1-42 (lyophilized) </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>American Peptide Co.</td>
<td>62-0-80</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-Propanol (HFIP)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fluka</td>
<td>52517</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dimethylsulfoxide (DMSO)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biotium</td>
<td>90082</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50mL Polypropylene Centrifuge Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning</td>
<td>05-538-67</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1.5ml MaxyClear microtubes Maximum recovery</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Axygen</td>
<td>MCT-150-L-C</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Phosphate-Buffered Saline pH 7.4</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen-Gibco</td>
<td>10010-023</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>GASTIGHT Syringes 250 &mu;L</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hamilton</td>
<td>1725</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bath sonicator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Branson</td>
<td>3510</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Savant SpeedVac Concentrator System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Various distributors</td>
<td>SC 110A</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

preparation of oligomeric &beta;-amyloid1-42 and induction of synaptic plasticity impairment on hippocampal slices

Synaptic कनेक्शन की हानि सूक्ष्म amnesic अल्जाइमर रोग (ई.) के प्रारंभिक चरणों में होने वाली परिवर्तन आबाद होने की संभावना है. (Aβ) β-amyloid, एक पेप्टाइड ई. में उच्च मात्रा में उत्पादित, दीर्घकालिक potentiation (LTP), सीखने और स्मृति के एक सेलुलर सहसंबंधी को कम करने के लिए जाना जाता है. दरअसल, LTP Aβ द्वारा कारण हानि ई. मॉडल में और स्क्रीनिंग कम करने या लौटना ऐसे synaptic impairments के सक्षम दवाओं के लिए synaptic dysfunctions के अध्ययन के लिए एक उपयोगी प्रयोगात्मक प्रतिमान है. अध्ययनों से पता चला है कि Aβ अपनी oligomeric फ़ॉर्म के द्वारा LTP व्यवधान preferentially उत्पादन. यहाँ हम oligomerized सिंथेटिक के छिड़काव से आई. LTP के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल तीव्र hippocampal स्लाइस पर Aβ1-42 पेप्टाइड प्रदान. इस वीडियो में, हम oligomeric Aβ की तैयारी के लिए एक कदम दर कदम प्रक्रिया की रूपरेखा<sub1-42&gt;</sub&gt;. फिर, हम एक व्यक्ति है जो प्रयोग में LTP hippocampal oligomerized Aβ को उजागर स्लाइस में कम है का पालन करें<sub1-42&gt;</sub&gt; जहाँ कोई Aβ एक नियंत्रण प्रयोग में स्लाइस की तुलना<sub1-42&gt;</sub&gt; जोखिम हुआ था.

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Preparation of Oligomeric &#946;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

अल्जाइमर रोग की एक विशेषता Aβ की पदोन्नति है<sub1-42&gt;</sub&gt; पेप्टाइड. यहाँ हम सिंथेटिक Aβ तैयार करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान<sub1-42&gt;</sub&gt; Oligomers, जो hippocampal दीर्घकालिक potentiation impairs एक सेलुलर स्मृति के सहसंबंधी. यह प्रक्रिया Aβ प्रेरित विकृति और दवा स्क्रीनिंग के तंत्र की जांच करने के लिए उपयोगी है.

Oligomeric β-amyloid की तैयारी<sub1-42> Hippocampal स्लाइसें और synaptic plasticity हानि की प्रेरण

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

चूहे और ट्रांसजेनिक चूहों से एजिंग और Amyloid पैथोलॉजी के दौरान Synaptic बदलाव के अध्ययन के लिए तीव्र hippocampal स्लाइस की तैयारी

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

कृंतक मस्तिष्क स्लाइसें से न्यूरॉन्स की Vibrodissociation Synaptic पारेषण और छवि presynaptic टर्मिनल अध्ययन करने के लिए

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Lateral Diffusion and Exocytosis of Membrane Proteins in Cultured Neurons Assessed using Fluorescence Recovery and Fluorescence-loss Photobleaching

के लेटरल और सभ्य न्यूरॉन्स में झिल्ली प्रोटीन का प्रसार exocytosis प्रतिदीप्ति रिकवरी और प्रतिदीप्ति नुकसान Photobleaching का उपयोग मूल्यांकन

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Hippocampal टुकड़ा संस्कृतियों में पोस्ट-embedding Synaptic प्रोटीन Immunogold लेबल

Immunoelectron microscopy is a powerful tool to study biological molecules at the subcellular level. Antibodies coupled to electron-dense markers such as ...

Improved Preparation and Preservation of Hippocampal Mouse Slices for a Very Stable and Reproducible Recording of Long-term Potentiation

दीर्घकालिक potentiation की एक बहुत ही स्थिर और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य रिकॉर्डिंग के लिए बेहतर तैयारी और hippocampal माउस स्लाइस का संरक्षण

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Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

माउस हिप्पोकैंपस में Oligomeric Amyloid-बीटा की Stereotaxic आसव

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from Rodents

कृन्तकों से तीव्र हिप्पोकैम्पस स्लाइस का उपयोग Synaptic टैगिंग / कैद और क्रॉस-कब्जा की जांच

Synaptic tagging and capture (STC) and cross-tagging are two important mechanisms at cellular level that explain how synapse-specificity and associativity ...

Measuring Synaptic Vesicle Endocytosis in Cultured Hippocampal Neurons

कल्चरल हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स में Synaptic पुटिका Endocytosis को मापने

During endocytosis, fused synaptic vesicles are retrieved at nerve terminals, allowing for vesicle recycling and thus the maintenance of synaptic ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

एक छोटी मात्रा रीसाइक्लिंग में बनाए रखा तीव्र हिप्पोकैम्पस स्लाइस में Synaptic प्लास्टिक रिकॉर्डिंग-, छिड़काव-, और डुबकी-प्रकार चैंबर प्रणाली

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model

Pentylenetetrazole-प्रेरित जलना माउस मॉडल

Pentylenetetrazole (PTZ) is a GABA-A receptor antagonist. An intraperitoneal injection of PTZ into an animal induces an acute, severe seizure at a high ...

Oligomeric β-amyloid की तैयारी Hippocampal स्लाइसें और synaptic plasticity हानि की प्रेरण