Name: the subventricular zone en-face: wholemount staining and ependymal flow
Uploaded: 2010-05-06T16:22:00
Duration: 14 min 33 s
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NIH 그랜트 HD - 32116, 재단, 존 보스 줄기 세포 기금, MEXT, MHLW 및 HFSP를 지원하는 샌들러 가족 지원 작업. ZM는 카를로스 Baldoceda 재단과 UCSF Krevans 원정대에 의해 지원. AA - B. 헤더와 멜라니는 둘러 싸인 의자를 혼란 보유하고 있습니다.

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	<li>Doetsch, F., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Network+of+tangential+pathways+for+neuronal+migration+in+adult+mammalian+brain.">Network of tangential pathways for neuronal migration in adult mammalian brain.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93, 14895-14900 (1996).</li><li>Shen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+SVZ+stem+cells+lie+in+a+vascular+niche:+a+quantitative+analysis+of+niche+cell-cell+interactions.">Adult SVZ stem cells lie in a vascular niche: a quantitative analysis of niche cell-cell interactions.</a> Cell Stem Cell. 3, 289-300 (2008).</li><li>Tavazoie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+specialized+vascular+niche+for+adult+neural+stem+cells.">A specialized vascular niche for adult neural stem cells.</a> Cell Stem Cell. 3, 279-288 (2008).</li><li>Mirzadeh, Z., Merkle, F. T., Soriano-Navarro, M., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+confer+unique+pinwheel+architecture+to+the+ventricular+surface+in+neurogenic+regions+of+the+adult+brain.">Neural stem cells confer unique pinwheel architecture to the ventricular surface in neurogenic regions of the adult brain.</a> Cell Stem Cell. 3, 265-278 (2008).</li><li>Mirzadeh, Z., Han, Y. G., Soriano-Navarro, M., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cilia+organize+ependymal+planar+polarity.">Cilia organize ependymal planar polarity.</a> J Neurosci. 30, 2600-2610 (2010).</li><li>Doetsch, F., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+a+germinal+layer+in+the+adult+mammalian+brain.">Regeneration of a germinal layer in the adult mammalian brain.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96, 11619-11624 (1999).</li><li>Sawamoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+neurons+follow+the+flow+of+cerebrospinal+fluid+in+the+adult+brain.">New neurons follow the flow of cerebrospinal fluid in the adult brain.</a> Science. 311, 629-632 (2006).</li><li>Coskun, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD133++neural+stem+cells+in+the+ependyma+of+mammalian+postnatal+forebrain.">CD133+ neural stem cells in the ependyma of mammalian postnatal forebrain.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105, 1026-1031 (2008).</li><li>Merkle, F. T., Mirzadeh, Z., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+organization+of+neural+stem+cells+in+the+adult+brain.">Mosaic organization of neural stem cells in the adult brain.</a> Science. 317, 381-384 (2007).</li><li>Young, K. M., Fogarty, M., Kessaris, N., Richardson, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subventricular+zone+stem+cells+are+heterogeneous+with+respect+to+their+embryonic+origins+and+neurogenic+fates+in+the+adult+olfactory+bulb.">Subventricular zone stem cells are heterogeneous with respect to their embryonic origins and neurogenic fates in the adult olfactory bulb.</a> J Neurosci. 27, 8286-8296 (2007).</li><li>Waclaw, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zinc+finger+transcription+factor+Sp8+regulates+the+generation+and+diversity+of+olfactory+bulb+interneurons.">The zinc finger transcription factor Sp8 regulates the generation and diversity of olfactory bulb interneurons.</a> Neuron. 49, 503-516 (2006).</li><li>Kohwi, M., Osumi, N., Rubenstein, J. L., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pax6+is+required+for+making+specific+subpopulations+of+granule+and+periglomerular+neurons+in+the+olfactory+bulb.">Pax6 is required for making specific subpopulations of granule and periglomerular neurons in the olfactory bulb.</a> J Neurosci. 25, 6997-7003 (2005).</li><li>Kohwi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subpopulation+of+olfactory+bulb+GABAergic+interneurons+is+derived+from+Emx1-+and+Dlx5/6-expressing+progenitors.">A subpopulation of olfactory bulb GABAergic interneurons is derived from Emx1- and Dlx5/6-expressing progenitors.</a> J Neurosci. 27, 6878-6891 (2007).</li><li>Hack, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+fate+determinants+of+adult+olfactory+bulb+neurogenesis.">Neuronal fate determinants of adult olfactory bulb neurogenesis.</a> Nat Neurosci. , (2005).</li><li>Ventura, R. E., Goldman, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+radial+glia+generate+olfactory+bulb+interneurons+in+the+postnatal+murine+brain.">Dorsal radial glia generate olfactory bulb interneurons in the postnatal murine brain.</a> J Neurosci. 27, 4297-4302 (2007).</li><li>Kelsch, W., Mosley, C. P., Lin, C. W., Lois, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+mammalian+precursors+are+committed+to+generate+neurons+with+defined+dendritic+projection+patterns.">Distinct mammalian precursors are committed to generate neurons with defined dendritic projection patterns.</a> PLoS Biol. 5, e300 (2007).</li><li>Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+centrosome+inheritance+maintains+neural+progenitors.">Asymmetric centrosome inheritance maintains neural progenitors.</a> Nature. 461, 947-955 (2009).</li></ol>

심실과 subventricular 영역에서 neurogenesis 대부분의 연구 microanatomy 이러한 지역에서 휴대 관계를 조사하는 클래식 sectioning 기술에 의존합니다. 여기 우리는 다음 방지 mitotic 처리 6, 그리고 가장 최근에 정확한 혀끝의 연구를하는 데 사용되는 다음과 같은 SVZ의 시조 인구의 재생을 연구하는 데 먼저 SVZ 1 생성 neuroblasts의 철새 체인의 네트워크를 분석하는 데 사용되는 대체 기술, 설명 성인 SVZ 신경 줄기 세포 2,3,4의 기저 세포 - 세포 상호 작용. 흥미롭게도,이 기술은 성인 SVZ의 신경 줄기 세포 또는 형식 B1 세포가 차별이 아닌 나누어 ependymal 전지와 혼합 neuroepithelium의 일부입니다 것으로 나타났습니다. wholemounts를 사용 엉 - 얼굴 영상이 혼합 neuroepithelium는 ependymal 세포 4 대형 혀끝의 표면에 둘러싸여 타입 B1 세포의 꼭대기의 엔딩 구성된 바람개비 아키텍처를 가지고 나타났습니다. 이 엉 - 얼굴 분석 혈관 틈새 문의 뇌실 표면에 혀끝의 엔딩과 기초 프로세스 세포의 구성으로 배아와 성인 두뇌의 신경 줄기 세포의 혈통에 대한 우리의 이해를 명확히하고 있습니다. 이러한 연구 결과는 고전 sectioning 기술을 사용하여 거의 불가능했을. Wholemounts들은 또한 뇌실 - 문의 혀끝의 과정을 통해 신경 줄기 세포의 식별을 용이하게합니다. 이러한 줄기 세포에 대한 더 구체적인 마커가 발견됨에 wholemounts는 신경 줄기 세포의 행동을 식별하고 분석의 중요한 부분이 될 것입니다. 측면 뇌실 벽의 Wholemounts도 ependymal 세포의 평면 극성을 공부하고 이상적인 관점을 제공합니다. Ependymal 세포는 조정 방식으로 CSF를 추진하기 위해 함수 심실을 안감 multiciliated 세포 수 있습니다. wholemount 기술과 함께, 전체 ependymal 상피는 엉 - 얼굴을 노출하고 사후하고 복부 등의 경계에 스테인드하고 앞쪽에에서 종합적으로 연구하실 수 있습니다. 또한, ependymal 흐름 assays가 심하게 해부에 수행, 라이브 wholemounts는 견고 ependymal 속눈썹에 의해 생성되는 평면 편광 흐름을 보여줍니다. wholemount 접근법을 사용하는 최근의 작품이 ependymal 평면 극성 5 determinants 세포를 발견했다. 흥미롭게도, wholemount 연구는 ependymal 생성된 CSF의 흐름 SVZ 7 젊은 뉴런의 마이 그 레이션 가이드 chemorepellents의 그라디언트를 설립 것을 제안했습니다. 처음에는 철새의 연결 고리의 네트워크를 확인 Wholemount 접근 따라서 체인 마이 그 레이션을 조절 메커니즘에 대한 통찰력을 제공하기 위해 계속됩니다. wholemount 영상으로 VZ과 SVZ 분석 모두 미래 연구와 기존 연구에 대한 우리의 이해를 명확히하는 방법에 대한 새로운 접근법을 추가합니다. 예를 들어, 최근 연구는 성인 SVZ에서 신경 줄기 세포는 뇌실 8 접촉 CD133 + / CD24 - 세포다고 제안했습니다. 섹션에서 immunostaining을 바탕으로,이 작가는 이러한 세포가 multiciliated ependymal 세포의 subpopulation다고 주장했다. 그러나, 전체 ependymal 상피의보다 포괄적인 전망을 제공 wholemount 접근법을 사용하여 우리의 연구에서, 우리는 발견 모든 ependymal 세포 표현 CD24 및 유일한 뇌실 - 접촉 타입 B1의 일부는 + / CD24 -되었습니다 CD133되었습니다 세포를 세포 4. 또한, wholemount 기술은 성인 뇌의 9 신경 줄기 세포의 최근 설명 모자이크 조직 검사 향후 연구에 도움이 될 것을 약속드립니다. 몇몇 연구는 성인 두뇌의 신경 줄기 세포가 균질 인구 아니라는 것을 보여주지만, 지역 지정 및 일반적으로 후각 망울의 interneurons의 특정 subtypes을 생산합니다. 이러한 연구는 신경 줄기 세포의 다른 subpopulations이 특정 전사 요인 10,11,12,13,14 및 / 표현하거나의 지느러미 - 복부와 앞쪽에 - 사후 extents 함께 자신의 지역 로컬 라이제이션을 통해 구분할 수있다 것을 제안 측면 벽 9,15,16. 성인 신경 줄기 세포의 지역 지정 subpopulations 더 많은 분자 마커가 발견됨에 wholemount 영상은 심실 벽을 따라 각 시조 도메인의 parcelation 종합 전망을 제공해야합니다. wholemount 해부 여기에 제시 이미징 기술은 또한 배아에있는 심실 벽을 분석하는 데 사용할 수 있습니다. 배아 측면 벽의 해부는 같은 방식으로, 단계별, 수행됩니다. 난이도에서만 약간의 차이가있다; 배아 심실은 절개가 쉽게 비교적 큰지만, 조직은 조작이 더 어렵게 부드럽고입니다. 특히, 측면 뇌실과 비슷한 노출 엠브리에서 사용할 수OS는 대뇌 피질의 neurogenesis을 공부하는 뇌실의 대뇌 피질의 장벽을 해부하다 수 있습니다. 최근 증거들은 비대칭 centrosome 상속 피질 neurogenesis 17시 심실 표면에서 요골 glia을 유지 제안합니다. 요골 glial 혀끝의 표면 엉 - 얼굴 영상이 나누어 세포 내에서 centrosomes가 불균형 상속하는 방법에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 특히 대부분의 기술, 정확한 손재주는 관련된 사람과 마찬가지로 숙달 연습이 필요합니다. 더 나은 결과를 핵심 해부 몇 요소, 그러나,있다 : 1) 조명은 그림자를 만들 수있는 샘플의 조명을 조절하면 같은 포셉를 사용하여) 그렇지 않으면, 2 비교적 균질는 조직의 절개하는 동안 귀중한 콘트라스트를 제공합니다 이 기법에서 두 곤충 핀 포셉 함께 비틀거나 조직을 데리러 사용하지 않습니다하지만), 부드러운 철회의 균형을 3 절단하고 칼을 절단하지 말아야하는 동안 조직을 안정화시키기 위해 지속적으로 재조정 수있는 기동성 핀으로 사용됩니다 단 줄일뿐만 아니라이 절개의 대다수가 실제로에만 간헐적으로 절단과 부드러운 철회를 통해 수행되는 기억, 중간과 측면 벽을 분리하기 위해 부드러운 철회를 제공하는 데 사용됩니다.

the subventricular zone en-face: wholemount staining and ependymal flow

측면 심실의 벽 성인 포유류의 두뇌에서 가장 큰 새싹 지역을 포함하고 있습니다. 이 벽에 subventricular 영역 (SVZ)은 신경 줄기 세포의 행동과 성인 neurogenesis의 규정을 이해하기위한 광범위한 연구의 모델 시스템입니다. 전통적으로,이 연구는 histological 분석을위한 고전 sectioning 기술에 의존합니다. 여기서 우리는 다른 접근이 새싹 지역의 종합 엉 - 얼굴보기를 제공 wholemount 기법을 제시한다. 섹션에 비해 wholemounts는 SVZ 이내에 완료 cytoarchitecture와 세포 관계를 유지하고있다. 이 방법은 최근 성인 신경 줄기 세포 또는 형식 B1 세포는 측면 심실을 안감 차별 ependymal 세포와 혼합 neuroepithelium의 일부입니다 것으로 나타났습니다. 또한이 접근들은 뇌실에서 생성 ependymal 세포와 뇌척수 흐름의 평면 편광을 연구하는 데 사용되었습니다. 성인 신경 줄기 세포가 지역 지정 이기종 인구는 것을 최근에 증거로 wholemount 접근 가능성이 줄기 세포 틈새의 조직과 parcellation을 이해하는 필수적인 도구가 될 것입니다.

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The Subventricular Zone En-face: Wholemount Staining and Ependymal Flow

측면 뇌실 벽은 성인 포유류의 두뇌에서 가장 큰 새싹 지역을 포함하고 있습니다. 전통적으로이 지역에서 neurogenesis 연구는 histological 분석을위한 고전 sectioning 기술에 의존합니다. 여기서 우리는 다른 접근이 새싹 지역의 종합 엉 - 얼굴보기를 제공 wholemount 기법을 제시한다.

Subventricular 존 엉 - 얼굴 : Wholemount 스테 이닝 및 Ependymal 흐름

The walls of the lateral ventricles contain the largest germinal region in the adult mammalian brain. The subventricular zone (SVZ) in these walls is an ...

Research

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연구

신경과학

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One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke ...