Name: live-cell imaging and quantitative analysis of embryonic epithelial cells in xenopus laevis
Uploaded: 2010-05-23T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live-cell Imaging and Quantitative Analysis of Embryonic Epithelial Cells in Xenopus laevis at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (R01 - HD044750) ، منحة المهنة من مؤسسة العلوم الوطنية ، وبدعم من جمعية القلب الاميركية (البداية المنح التي تقدم للمساعدة). الكتاب أشكر أعضاء مختبر ديفيدسون : HY كيم ، M. Dassow فون وجيه تشو (للحصول على مساعدة ذوي المسؤوليات مختبر يوميا) ، وتشانغ لين لمساعدتها في مجال البيولوجيا الجزيئية وتوليف مرنا. نحن نعترف بجهود جميع مختبرات تجريبية من الضفدع (وخصوصا راي كيلر ودوغ لDeSimone) الذين ساهموا في جزء من هذا البروتوكول ، من خلال تطوير واختبار طرق مختلفة على مر السنين. نشكر ريتشارد هارلاند والينجفورد جون للهدايا من نوعها ، ذاكرة GFP والبلازميدات moesin - GFP على التوالي.

قبل أن تبدأ <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توج توليف مرنا من القالب الحمض النووي الترميز الخطي البروتين الموسومة fluorescently ومرنا تنقية بالطرق العادية (AmpliCap طقم النسخ ؛ Epicentre الحيوية ، ماديسون WI). وينبغي aliquoted مرنا للاستخدام مرة واحدة في 0.2 مل م?...

<ol>
	<li>Ninomiya, H., Winklbauer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+coating+controls+mesenchymal+shape+change+through+tissue-positioning+effects+and+reduction+of+surface-minimizing+tension.">Epithelial coating controls mesenchymal shape change through tissue-positioning effects and reduction of surface-minimizing tension.</a> Nat Cell Biol. 10 (1), 61-61 (2008).</li><li>Kay, B. K., Peng, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Xenopus laevis: Practical Uses in Cell and Molecular Biology. , (1991).</li><li>Cross, M. K., Powers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obtaining+eggs+from+Xenopus+laevis+females.">Obtaining eggs from Xenopus laevis females.</a> J Vis Exp. , (2008).</li><li>Cohen, S., Au, S., Pante, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microinjection+of+Xenopus+laevis+oocytes.">Microinjection of Xenopus laevis oocytes.</a> J Vis Exp. , (2009).</li><li>Nieuwkoop, P. D., Faber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Normal Tables of Xenopus laevis (Daudin). , (1967).</li><li>Davidson, L. A., Ezin, A. M., Keller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+wound+healing+by+apical+contraction+and+ingression+in+Xenopus+laevis.">Embryonic wound healing by apical contraction and ingression in Xenopus laevis.</a> Cell Motil Cytoskeleton. 53 (3), 163-163 (2002).</li><li>Joshi, S. D., Dassow, M. v. o. n., Davidson, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+control+of+excitable+embryonic+tissues:+three+stimuli+induce+rapid+epithelial+contraction.">Experimental control of excitable embryonic tissues: three stimuli induce rapid epithelial contraction.</a> Exp Cell Res. 316 (1), 103-103 (2010).</li></ol>

قدمنا ​​البروتوكولات التجريبية تستخدم بانتظام في المختبر لتغيير صورة الهيكل الخلوي حيوي في القشرة خلية قمية وتتأرجح أغشية الخلايا من الخلايا الظهارية في أجنة القيطم. ينبغي للمرء أن استخدام هذه البروتوكولات كنقطة انطلاق للتصوير يعيش من الأشكال الخلايا الظها?...

live-cell imaging and quantitative analysis of embryonic epithelial cells in xenopus laevis

الخلايا الظهارية الجنينية بمثابة نموذج مثالي لدراسة التشكل حيث متعددة الخلايا الأنسجة تغيرات في الهندسة الخاصة بهم ، مثل التغيرات في المنطقة وارتفاع سطح الخلية الخلية ، وفيها خلايا الخضوع الانقسام والهجرة. وعلاوة على ذلك ، يمكن أيضا تنظيم الخلايا الظهارية الحركات التخلق في الأنسجة المجاورة<sup&gt; 1</sup&gt;. والطريقة التقليدية لدراسة الخلايا والأنسجة الطلائية تنطوي على تثبيت النسيجية والكيميائية وأساليب لتحديد مورفولوجية الخلية أو توطين بروتينات معينة من الفائدة. هذه الأساليب لا تزال مفيدة وتوفر &quot;لقطات&quot; من الأشكال الخلايا والأنسجة العمارة ، ومع ذلك ، لا يزال هناك الكثير يجب أن يفهم حول كيفية الحصول على خلايا محددة الأشكال ، وكيفية نقل أو البروتينات المختلفة لتوطين وظائف محددة ، وما هي الخلايا اتبع المسارات نحو النهائي لها مصير متباينة. ارتفاع القرار يعيش التصوير يكمل الأساليب التقليدية ، ويسمح أيضا مزيد من التحقيق المباشر في العمليات الحيوية الخلوية المشاركة في ، وتشكيل صيانة التشكل ، وصحائف متعددة الخلايا الظهارية. هنا نظهر الطرق التجريبية من العزلة من الأنسجة الحيوانية من قبعة<em&gt; القيطم المورق</em&gt; أجنة لتصوير مبائر من الخلايا الظهارية ونهج القياس البسيطة التي يمكن أن تزيد معا الدراسات الجزيئية والخلوية التشكل الظهارة.

Watch this Scientific Journal Video about Live-cell Imaging and Quantitative Analysis of Embryonic Epithelial Cells in Xenopus laevis at JoVE.com

Live-cell Imaging and Quantitative Analysis of Embryonic Epithelial Cells in Xenopus laevis

القيطم ظهائر الجنينية هي نموذج مثالي لنظام دراسة سلوكيات الخلية مثل التنمية وتغير شكل القطبية خلال التشكل الظهارة. ويتزايد الأنسجة التقليدية لعينات محددة يجري استكمالها التصوير الخلية الحية مبائر. هنا نظهر طرق لعزل الأنسجة الضفادع وتصور الخلايا الظهارية العيش والهيكل الخلوي وذلك باستخدام الخلايا الحية المجهري متحد البؤر.

تعيش خلية التصوير والتحليل الكمي من الخلايا الظهارية في الجنينية القيطم المورق</em

Embryonic epithelial cells serve as an ideal model to study morphogenesis where multi-cellular tissues undergo changes in their geometry, such as changes ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live-cell Imaging and Quantitative Analysis of Embryonic Epithelial Cells in Xenopus laevis

Plastic Embedding and Sectioning of Xenopus laevis Embryos

البلاستيك وتضمينها Sectioning الجنين المورق القيطم

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

الحصول على البيض من الإناث المورق القيطم

The eggs of Xenopus laevis intact, lysed, and/or fractionated are useful for a wide variety of experiments. This protocol shows how to induce egg laying, ...

Preparation and Fractionation of Xenopus laevis Egg Extracts

إعداد والتقطير من البيض مقتطفات القيطم المورق

Crude and fractionated Xenopus egg extracts can be used to provide ingredients for reconstituting cellular processes for morphological and biochemical ...

Microinjection of Xenopus Laevis Oocytes

Microinjection من البويضات المورق القيطم

Microinjection of Xenopus laevis oocytes followed by thin-sectioning electron microscopy (EM) is an excellent system for studying nucleocytoplasmic ...

Tissue Determination Using the Animal Cap Transplant (ACT) Assay in Xenopus laevis

Tissue Determination Using the Animal Cap Transplant ACT Assay in Xenopus laevis

تحديد الأنسجة باستخدام زرع رسملة الحيوان (ACT) في الفحص القيطم المورق</em

Many proteins play a dual role in embryonic development. Those that regulate cell fate determination in a specific tissue can also affect the development ...

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

الكمية خلية حية الإسفار - المجهري تحليل الخميرة الانشطار

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

تحليل سريع لالوراثية طلائي-الوسيطة اشارة خلال تجديد الشعر

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

الاستقراء وتحليل الظهارية الوسيطة الانتقالية ل

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Facial Transplants in Xenopus laevis Embryos

Facial Transplants in Xenopus laevis Embryos

زرع الوجه في<em&gt; القيطم المورق</em&gt; الأجنة

Craniofacial birth defects occur in 1 out of every 700 live births, but etiology is rarely known due to limited understanding of craniofacial development. ...

Profiling Individual Human Embryonic Stem Cells by Quantitative RT-PCR

التنميط الفردية الخلايا الجذعية الجنينية البشرية من خلال الكمي RT-PCR

Heterogeneity of stem cell population hampers detailed understanding of stem cell biology, such as their differentiation propensity toward different ...