Name: in situ quantification of pancreatic beta-cell mass in mice
Uploaded: 2010-06-07T17:00:00
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L&#39;étude est soutenue par l&#39;US Public Health Service Grant DK-081527, 072473 et DK-DK-20595 à l&#39;Université de Chicago recherche sur le diabète et le Centre de Formation (Animal Core Model), et un don de la Fondation de la Famille Kovler.

Partie 1: Préparation des spécimens <ol><li> Placez une souris sous un microscope de dissection, retirer tout le pancréas avec le duodénum et la rate encore attaché, et placer les organes sur une lame de verre pré-pesés. Retirez le duodénum en coupant le tissu conjonctif le long du côté où il est lié au pancréas. Couper et enlever la rate et l&#39;excès de graisse sur le pancréas jusqu&#39;à ce que le pancréas est complètement isolée sur la diapositive. (Graisse pancréatique se distingue par sa cou...

<ol>
	<li>Miller, K., Kim, A., Kilimnik, G., Moka, U., Jo, J., Periwal, V., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+formation+during+the+neonatal+development+in+mice.">Islet formation during the neonatal development in mice.</a> PloS One. 4, E7739-E7739 (2009).</li><li>Kilimnik, G., Kim, A., Jo, J., Miller, K., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+pancreatic+islet+distribution+in+situ+in+mice.">Quantification of pancreatic islet distribution in situ in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 297, E1331-E1338 (2009).</li><li>Hara, M., Wang, X., Kawamura, T., Bindokas, V. P., Dizon, R. F., Alcoser, S. Y., Magnuson, M. A., Bell, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+with+green+fluorescent+protein-labeled+pancreatic+beta+-cells.">Transgenic mice with green fluorescent protein-labeled pancreatic beta -cells.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 284, E177-E183 (2003).</li><li>Hara, M., Dizon, R. F., Glick, B. S., Lee, C. S., Kaestner, K. H., Piston, D. W., Bindokas, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+pancreatic+beta-cells+in+the+intact+pancreas.">Imaging pancreatic beta-cells in the intact pancreas.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 290, E1041-E1047 (2006).</li></ol>

L&#39;analyse des images virtuelles Slice d&#39;îlots et de cellules bêta dans le pancréas grappes intactes offre une vue à grande échelle de toute la distribution des îlots. Évolution et les changements dans la distribution de l&#39;îlot au total au cours du temps peuvent ainsi être étudiées et comparées. Un tel exemple est montré dans notre analyse de la formation des îlots pancréatiques (1). Une analyse complète de pancréas des souris néonatales à des moments différents (P1-P21) a démontré que l...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltex</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>14001-13</td>
<td>01n2</td>
</tr>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>14072-10</td>
<td>02s5	</td>
</tr>
<tr>
<td>Large glass slide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>71862-01</td>
<td>75x51x1.2mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Large cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ted Pella, Inc</td>
<td>260462</td>
<td>50x75mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass Slide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-550-15</td>
<td>25x75x1.0mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-458-5M</td>
<td>75x25mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Erie Scientific</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>25mm circle</td>
</tr>
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus IX-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus SZX12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Investigator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MicroBrightField</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MIP-GFP mice</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Jackson Laboratory</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in situ quantification of pancreatic beta-cell mass in mice

Traçage des changements de populations de cellules spécifiques dans la santé et la maladie est un objectif important de la recherche biomédicale. Le processus de surveillance du pancréas des cellules bêta des îlots prolifération et la croissance est particulièrement difficile. Nous avons développé une méthode pour capturer la distribution de cellules bêta dans le pancréas intact de souris transgéniques avec fluorescence taggés bêta-cellules avec une macro écrite pour ImageJ (rsb.info.nih.gov / ij /). Après dissection du pancréas et de compensation des tissus, le pancréas entier est capturé comme une tranche virtuel, après quoi le GFP-taggés bêta-cellules sont examinées. L&#39;analyse inclut la quantification du total des cellules bêta des îlots nombre domaine, et la distribution granulométrique en référence à des paramètres spécifiques et des emplacements pour chaque îlot et des petits amas de cellules bêta. La distribution complète des îlots peuvent être tracées en trois dimensions, et les informations provenant de la distribution de la taille et la forme de chaque îlot permet une comparaison quantitative et qualitative des changements dans l&#39;ensemble des cellules bêta région à un coup d&#39;œil.

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In situ Quantification of Pancreatic Beta-cell Mass in Mice

Le protocole suivant décrit le processus de dissection pancréatique pour imagerie en coupes virtuelles, et la quantification ultérieure de tous les GFP-taggés cellules bêta dans le pancréas entier.

Dans la quantification in situ des cellules bêta pancréatiques chez des souris de masse

Tracing changes of specific cell populations in health and disease is an important goal of biomedical research. The process of monitoring pancreatic ...

Research

JoVE Journal

Biology

In situ Quantification of Pancreatic Beta-cell Mass in Mice

Transplantation of Pancreatic Islets Into the Kidney Capsule of Diabetic Mice

Transplantation d&#39;îlots pancréatiques dans la capsule du rein de souris diabétiques

Our protocol was developed to cleanly and easily deliver islets or cells under the kidney capsule of diabetic or normal mice.  We found that it was easier ...

Recherche

Biologie

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Quantification of &#947;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification des γH2AX Foci en réponse aux radiations ionisantes

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Assistée par ordinateur à grande échelle de visualisation et quantification de la messe des îlots pancréatiques, distribution de taille et d&#39;architecture

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Evaluation de la fonction musculaire du muscle long extenseur des orteils<em&gt; Ex vivo</em&gt; Et du jambier antérieur<em&gt; In situ</em&gt; Chez la souris

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Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualisation et d&#39;analyse de molécules d&#39;ARNm par fluorescence<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridation dans<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

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Résolution Quantification haut de Crystalline Cellulose Accumulation dans<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Roots pour surveiller cellulaire spécifique d&#39;un tissu mural Modifications

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Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization FISH with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Observation et la quantification des télomères et des séquences répétitives utilisant Fluorescence<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridation (FISH) avec PNA Sondes en<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Telomere is a ribonucleoprotein structure that protects chromosomal ends from aberrant fusion and degradation. Telomere length is maintained by telomerase ...

Analysis of Beta-cell Function Using Single-cell Resolution Calcium Imaging in Zebrafish Islets

Analyse de la fonction des cellules bêta à l’aide d’imagerie calcique résolution unicellulaire dans les îlots de poisson-zèbre

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Establishing a Diaphyseal Femur Fracture Model in Mice

Établissement d’un modèle de fracture du fémur diaphysaire chez la souris

Bones have a significant regenerative capacity. However, fracture healing is a complex process, and depending on the severity of the lesions and the age ...