इच्छामृत्यु वाले जानवर से छोटी आंत को अलग करके शुरू करें और ऊतक को पेट्री डिश में स्थानांतरित करें। प्रयोगशाला कैंची और चिमटी का उपयोग करके, छोटी आंत से वसा ऊतकों को हटा दें। फिर, छोटी आंत को कई खंडों में काट लें।
पांच मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग करके, ल्यूमिनल सामग्री को साफ करने के लिए पांच मिलीलीटर ठंडे पीबीएस-एंटीबायोटिक दवाओं के साथ छोटी आंत को फ्लश करें। प्रयोगशाला कैंची का उपयोग करके ऊतक को लंबाई में काटें। फिर, हिलाते समय इसे ठंडे पीबीएस-एंटीबायोटिक दवाओं के साथ मैन्युअल रूप से धो लें।
प्रयोगशाला कैंची का उपयोग करके, आंतों के खंड को लगभग पांच मिलीमीटर से पांच मिलीमीटर मापने वाले टुकड़ों में काट लें। एकत्र किए गए टुकड़ों को 50-मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करने के लिए एक पिपेट का उपयोग करें। इसके बाद, ऊतक के टुकड़ों वाली ट्यूब में 25 मिलीलीटर ठंडा पीबीएस-एंटीबायोटिक्स जोड़ें और ऊतक के टुकड़ों से आंतों की सामग्री को धोने के लिए ट्यूब को 10 बार आगे और पीछे हिलाएं।
धोने के बाद बफर को एस्पिरेट करें। ऊतक के टुकड़े अब क्रिप्ट अलगाव के लिए तैयार हैं।
