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01:33 min
May 26th, 2023
DOI :
10.3791/200090-v
Transcript
首先,用成纤维细胞培养基进行皮肤活检管。取出培养基,用五毫升无菌预热的PBS清洗皮肤穿刺活检三次。使用无菌镊子,将皮肤穿刺活检转移到10厘米的细胞培养板上,并用无菌手术刀将其横向切成三到四块,留下表皮和真皮。
将每块转移到无菌的35毫米塑料细胞培养皿中,然后将其轻轻按入培养皿中。让它干燥5至10分钟,直到液体蒸发并将活检附着在细胞培养塑料上。使用 1, 000 微升移液管,在活检周围滴加 1 毫升成纤维细胞培养基,最终体积为 3 毫升。
将样品在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育 7 天,无需喂食或移动培养皿。在孵育结束时,将培养基更换为新鲜的预热成纤维细胞培养基。最后,使用相差显微镜监测皮肤活检周围生长的纺锤形成纤维细胞,并在培养后冷冻选定的细胞。
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