शुरू करने के लिए, फाइब्रोब्लास्ट माध्यम के साथ त्वचा बायोप्सी ट्यूब लें। माध्यम को हटा दें, और त्वचा पंच बायोप्सी को पांच मिलीलीटर बाँझ, पूर्व-गर्म पीबीएस के साथ तीन बार धोएं। बाँझ बल का उपयोग करके, त्वचा पंच बायोप्सी को 10-सेंटीमीटर सेल कल्चर प्लेट में स्थानांतरित करें, और एपिडर्मिस और डर्मिस को छोड़ते हुए इसे बाँझ स्केलपेल के साथ तीन या चार टुकड़ों में काट लें।
प्रत्येक टुकड़े को एक बाँझ, 35-मिलीमीटर, प्लास्टिक सेल कल्चर डिश में स्थानांतरित करें, और इसे संस्कृति पकवान में धीरे से दबाएं। इसे पांच से 10 मिनट तक सूखने दें जब तक कि तरल वाष्पित न हो जाए और बायोप्सी सेल कल्चर प्लास्टिक से जुड़ी हो। 1,000-माइक्रोलीटर पिपेट का उपयोग करके, बायोप्सी के चारों ओर एक मिलीलीटर फाइब्रोब्लास्ट माध्यम ड्रॉपवाइज को तीन मिलीलीटर की अंतिम मात्रा में जोड़ें।
पकवान को खिलाए या हिलाए बिना नमूने को 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर सात दिनों के लिए इनक्यूबेट करें। इनक्यूबेशन के अंत में, माध्यम को ताजा, पूर्व-गर्म फाइब्रोब्लास्ट माध्यम में बदलें। अंत में, त्वचा बायोप्सी के चारों ओर आउटग्रोन स्पिंडल जैसे फाइब्रोब्लास्ट की निगरानी के लिए एक चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप का उपयोग करें, और उन्हें बढ़ने के बाद चयनित कोशिकाओं को फ्रीज करें।