Para começar, tome o tubo de biópsia de pele com meio fibroblasto. Retire o meio e lave a biópsia de punção de pele três vezes com cinco mililitros de PBS estéril pré-aquecido. Com pinça estéril, transferir a biópsia por punch de pele para uma placa de cultura celular de 10 centímetros e cortá-la em três ou quatro pedaços com bisturi estéril, deixando a epiderme e a derme.
Transfira cada peça para uma placa de cultura de células plásticas estéril de 35 milímetros e pressione-a suavemente na placa de cultura. Deixe secar por cinco a 10 minutos até que o líquido evapore e a biópsia seja anexada ao plástico de cultura celular. Usando uma pipeta de 1.000 microlitros, adicione um mililitro de fibroblasto ao redor da biópsia para um volume final de três mililitros.
Incubar a amostra durante sete dias a 37 graus Celsius e 5% de dióxido de carbono sem alimentar ou mover o prato. No final da incubação, troque o meio para meio de fibroblastos fresco e pré-aquecido. Finalmente, use um microscópio de contraste de fase para monitorar os fibroblastos fusiformes ao redor da biópsia de pele e congele as células selecionadas depois de cultivá-las.