使用鸡蛋烛台用铅笔沿着 E14 或 E15 胚胎上方气穴的周边进行描摹，并用透明胶带覆盖轮廓区域。使用弯曲或细剪刀，在描边区域周围轻轻剪裁。注意不要切入胚胎膜或血管。
然后丢弃外壳的顶部。将雏鸡胚胎斩首后，将头部放入装有冷无菌CMF溶液的10厘米培养皿中。使用无菌细钳，剥开覆盖大脑的皮肤，露出下面的硬脑膜。
去除大脑左侧和右侧正在形成的颅骨。正在形成的颅骨尚未覆盖大部分大脑。轻轻地用细尖的镊子撕开脑膜，覆盖大脑的中心，并将其剥到两侧以露出大脑。
使用细弯曲的镊子，从底部前部舀起大脑，然后轻轻地将其从腔中拉出。将大脑解剖为前脑、中脑或视突和小脑的三个主要部分。使用细镊子从tecta中取出上覆的软脑膜，并将解剖的脑区域放在冰上的小无菌盘中。
对于嵌入和切片大脑，用弯曲的镊子轻轻地拿起视盖或前脑区域作为勺子，并在无菌纱布上稍微吸干以去除多余的液体。通过在适当大小的物体周围形成铝箔来准备一个简单的模具。在这里，一个小的矩形金属振动组织切片机块用作对象。
使用无菌转移移液管，用低熔点琼脂糖填充模具。快速将大脑区域放入琼脂糖中，让它在冰上凝固约四到五分钟。使用蓝宝石刀在振动组织切片机上切割切片。
使用无菌刮刀舀起切片并从托盘中取出。使用另一把无菌刮刀轻轻地将切片从刮刀上滑落到膜插入物上。将脑切片的六孔板放在细胞培养箱中的膜插入物上，温度为37摄氏度和5%二氧化碳。
在板化后的第二天，使用无菌巴斯德移液器从插入物下方吸出培养基，并向膜插入物下方的每个孔中加入一毫升新鲜切片培养基。接下来，要将GBM细胞引入脑切片，使用设置为5微升的20微升微量移液管从培养皿中取出一到几个球状体。轻轻地将带有球状体的培养基排出到所需的脑切片上，并让球状体在切片上培养两到五天。
x体内视顶膜切片培养一周后的活力结果如图所示。用双苯甲酰亚胺染色细胞核和免疫染色层粘连蛋白的脑切片的共聚焦图像清楚地显示了以各种配置光学切片的正常和完整的血管。此处显示了用双苯甲酰亚胺染色SOX 2转录因子和全核的脑切片共聚焦Z堆栈的最大投影图像。
这些结果表明，雏鸡胚胎脑切片可以在膜插入物上培养约两周，并且在正常出现的血管和转录因子表达下保持活力。
