Per iniziare la valutazione citologica per confermare la sincronizzazione del ciclo estra, raccogliere delicatamente le cellule vaginali dal topo CD1 facendo rotolare il tampone contro la parete vaginale usando un piccolo tampone pre inumidito strisciare le cellule vaginali raccolte in una goccia da 20 microlitri di acqua sterile su un vetrino da microscopio e asciugare all'aria. Al microscopio, utilizzare l'ingrandimento 100X con illuminazione a campo luminoso per valutare la presenza di cellule epiteliali cornificate. Per la manipolazione cervicale, posizionare una femmina ricevente sulla parte superiore di una gabbia con una gratella circa 0,5 ore prima dell'inseminazione consentendo al topo di afferrare la superficie della barra della gabbia afferrare vicino alla base della coda del topo usando il pollice e l'indice e inclinare la coda verso l'alto mentre stabilizza l'animale.
Inserire l'estremità smussata di una piccola asta di plastica vaginale per contattare la cervice e vibrare per 30 secondi per contatto con il trimmer. Per eseguire un trasferimento di spermatozoi non chirurgico per l'inseminazione artificiale, posizionare il dispositivo di inseminazione su una pipetta P200 impostata su 40 microlitri e rimuovere il coperchio protettivo. Rimuovere un'aliquota del campione di sperma capacitato dal piatto posto a 37 gradi Celsius e 5% di anidride carbonica e trasferirlo in un piatto di coltura tissutale da 35 millimetri senza olio a 37 gradi Celsius, premere lo stantuffo della pipetta fino al primo stop.
Abbassare la punta del catetere nel campione di sperma e caricare lentamente 40 microlitri del campione nel dispositivo di trasferimento. Rimuovere l'olio residuo dall'esterno del dispositivo di inseminazione utilizzando un fazzoletto assorbente prima di mettere da parte la pipetta. Quindi posizionare la femmina ricevente sulla parte superiore della gabbia della griglia.
Tieni il topo femmina in posizione afferrando vicino alla base della coda, usando il pollice e l'indice e inclina la coda verso l'alto mentre stabilizzi l'animale. Posizionare il piccolo speculum nella vagina e inserire il catetere del dispositivo di inseminazione nello speculum attraverso la cervice e nell'utero. Una volta che l'hub del dispositivo entra in contatto, lo speculum eroga lo sperma premendo lo stantuffo della pipetta fino al primo arresto.
Una volta fatto, rimuovere il dispositivo e lo speculum.
