रॉ 264.7 माइटोकॉन्ड्रिया के एक मिलीलीटर कच्चे अंश को 15-मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब में स्थानांतरित करके शुरू करें। 150 मिलीमोलर सोडियम क्लोराइड के साथ पूरक नमकीन माइटोकॉन्ड्रियल बफर के 7 मिलीलीटर जोड़ें। निलंबन के लिए, टीओएम 22 मोतियों के 50 माइक्रोलीटर जोड़ें और फिर कम गति पर घूमने वाले पहिया पर ट्यूब को इनक्यूबेट करें।
चुंबक पर एक स्तंभ रखें और कॉलम को नमकीन माइटोकॉन्ड्रियल बफर के आठ मिलीलीटर के साथ समतुल्य करें। प्रवाह-प्रवाह को छोड़ दें। नमूना इनक्यूबेशन के बाद, इसे कॉलम में स्थानांतरित करें और फ्लो-थ्रू को छोड़ दें।
इसके बाद, नमकीन माइटोकॉन्ड्रियल बफर के आठ मिलीलीटर के साथ कॉलम को तीन बार धोएं। चुंबक से स्तंभ निकालें और इसे 15-मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब में रखें। माइटोकॉन्ड्रिया को अलग करने के लिए, 1.5 मिलीलीटर नमकीन माइटोकॉन्ड्रियल बफर जोड़ें और ट्यूब में शुद्ध अंश को निकालने के लिए तुरंत एक प्लंजर लागू करें।
एक नए 1.5-मिलीलीटर ट्यूब में इल्यूटेड अंश को स्थानांतरित करें और 4 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए 21,000 जी पर सेंट्रीफ्यूजेशन करें। सतह पर तैरनेवाले को छोड़ दें और भविष्य के अध्ययन के लिए भूरे रंग के शुद्ध माइटोकॉन्ड्रियल गोली को 20 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। शुद्ध माइटोकॉन्ड्रियल अर्क के इम्यूनोब्लॉट विश्लेषण ने माइटोकॉन्ड्रियल साइट्रेट सिंथेज़ के संवर्धन और अन्य सेल ऑर्गेनेल से प्रोटीन की कमी को दिखाया।
इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके माइटोकॉन्ड्रियल अखंडता अध्ययन ने माइटोकॉन्ड्रिया को एक क्लासिक अंडाकार आकार और इलेक्ट्रॉन-घने एंटीबॉडी-लेपित मोतियों से घिरे बरकरार क्रिस्टे के साथ प्रकट किया। इसके अलावा, प्रोटिओम विश्लेषण ने माइटोकॉन्ड्रियल प्रोटीन और माइटोकॉन्ड्रियल और गैर-माइटोकॉन्ड्रियल प्रोटीन के अनुरूप दो अलग-अलग आबादी का संवर्धन दिखाया।