Comece a preparação da lâmina de vidro cortando um pedaço retangular de nanofita transparente de dupla face e colando-a no centro de uma lâmina de vidro limpa sem remover a película plástica protetora no lado superior da fita. Em seguida, disseque a calha removendo a porção superior das folhas mais velhas com um decapador de arame. Em seguida, segure a calha pelo mesocaudal e remova cuidadosamente as folhas circundantes com uma sonda dentária para extrair os primórdios de interesse.
Para montar o primórdio, remova a película protetora da fita. Coloque o primórdio exposto na fita. Cortar o primórdio na base com lâmina de barbear, descartando a haste basal e a hipocaudal.
Para um desenrolar mais suave, lubrifique a superfície interna ou adaxial da folha mergulhando a ponta da agulha em 100% de glicerol. Desenrolar o primórdio usando uma sonda dentária com uma agulha dobrada. Posicione a ponta da agulha paralela à superfície e desfralde a margem basal externa pressionando-a suavemente contra a fita.
Com a margem externa aderida à fita, alinhe a ponta da agulha paralelamente ao longo eixo da folha. Deslize suavemente a agulha para os lados para desenrolar e achatar a folha sobre a fita. Aplique uma gota de água no primórdio não enrolado.
Coloque imediatamente uma tampa deslizante sobre a gota de água e o primórdio. Pressione suavemente as bordas da tampa para que elas grudem na fita. Uma vez feito, coloque a lâmina no estágio do microscópio de epifluorescência para visualizar o fluoróforo.
Este método foi seguido para visualizar e analisar a expressão de proteínas fluorescentes em primórdios foliares de milho. Complementar à análise de corte transversal. A análise da montagem foliar inteira revelou padrões teciduais e de estágio específico de resposta formal durante a formação da nervura.
O método de análise de montagem total permitiu análises qualitativas e quantitativas da expressão de proteínas fluorescentes nos primórdios foliares do milho, indicando a eficácia deste método no exame dos primórdios foliares do milho, que são difíceis de obter devido à sua morfologia laminada.
