Начните подготовку предметного стекла, вырезав прямоугольный кусок прозрачной двусторонней наноленты и приклеив его к центру чистого предметного стекла, не снимая защитную пластиковую пленку с верхней стороны ленты. Затем рассеките желоб, удалив верхнюю часть старых листьев с помощью средства для зачистки проволоки. Затем держите желоб за мезокаудальный и осторожно удалите окружающие листья с помощью стоматологического зонда, чтобы извлечь интересующие зачатки.
Для монтажа примордиума снимите защитную пленку с ленты. Уложите оголенный зачаток на ленту. Срежьте зачаток у основания с помощью бритвенного лезвия, отбросив прикорневой стебель и подреберный.
Для более плавного разворачивания смажьте внутреннюю, или адаксиальную, поверхность листа, окунув кончик иглы в 100% глицерин. Разверните зачаток с помощью зубного зонда с изогнутой иглой. Расположите кончик иглы параллельно поверхности и разверните внешний базальный край, слегка прижав его к ленте.
При прилипании внешнего края к ленте выровняйте кончик иглы параллельно длинной оси листа. Аккуратно сдвиньте иглу в сторону, чтобы развернуть и расплющить лист на ленте. Нанесите каплю воды на развернутый зачаток.
Сразу же поставьте крышку на каплю воды и зачаток. Аккуратно прижмите края чехла к листу, чтобы они прилипли к ленте. После этого поместите предметное стекло на предметный столик эпифлуоресцентного микроскопа, чтобы визуализировать флуорофор.
Этот метод был использован для визуализации и анализа экспрессии флуоресцентных белков в зачатках листьев кукурузы. Дополняет анализ поперечного сечения. Анализ всего листа выявил характерные для тканей и стадий паттерны формального ответа во время формирования жилки.
Метод анализа полного массива позволил провести качественный и количественный анализ экспрессии флуоресцентных белков в зачатках листьев кукурузы, что указывает на эффективность этого метода при изучении зачатков листьев кукурузы, которые трудно изобразить из-за их свернутой морфологии.
