لبدء زراعة الخلايا ، قم بإعداد وسيط زراعة DMEM والحلول المطلوبة لزراعة الخلايا. بذرة 1 × 10 إلى خلايا HEK293 السادسة في لوحة 60 ملم أو لوحة 6 آبار لكل حالة معالجة بالإضافة إلى التحكم. في اليوم التالي ، عالج الخلايا بروابط متقاطعة لبروتين الحمض النووي ، أو DPCs ، المحرضات المفضلة.
للحث على DPCs ، وانتشارها في كل مكان و SUMOylation ، اجمع الخلايا في 20 و 60 و 180 دقيقة ، أو ساعتين في حالة DPCs غير الأنزيمية. للحث على استئصال TOP1-DPCs ، قم بمعالجة الخلايا مسبقا ب 10 ميكرومولار بولي ADP-ريبوز جليكوهيدرولاز ، أو مثبط PARG PDD00017273 ، لمدة ساعة واحدة قبل المعالجة المشتركة مع 20 ميكرومولار كامبتوثيسين لمدة 20 و 60 و 180 دقيقة.