Pour commencer la culture cellulaire, préparez le milieu de culture DMEM et les solutions nécessaires à la culture cellulaire. Semer 1 x 10 jusqu’à la 6e cellule HEK293 dans une plaque de 60 millimètres ou une plaque de 6 puits selon les conditions de traitement plus le contrôle. Le lendemain, traitez les cellules avec des réticulations ADN-protéines, ou DPC, inducteurs de choix.
Pour induire les DPC, leur ubiquitylation et leur SUMOylation, prélever les cellules à 20, 60 et 180 minutes, ou deux heures dans le cas de DPC non enzymatiques. Pour induire la PARylation des TOP1-DPC, prétraitez les cellules avec 10 micromolaires poly-ADP-ribose glycohydrolase, ou inhibiteur de PARG PDD00017273, pendant une heure avant de co-traiter avec 20 micromolaires camptothécine pendant 20, 60 et 180 minutes.