Prenez une microplaque préalablement préparée avec une solution antibuée et de l’agarose. Pipeter 75 microlitres de la bactérie dans les colonnes trois à 10. Ensuite, ajoutez 75 microlitres de tampon de phage stérile aux puits des colonnes trois et quatre en tant que témoin positif sans phage.
Mélanger la solution en tuyautant de haut en bas après chaque ajout. Ajoutez ensuite 75 microlitres de phage à des concentrations variées dans les colonnes et mélangez chaque solution en remontant et en descendant après chaque ajout. Collez les deux côtés courts de la plaque à l’aide de ruban d’étiquetage de 0,5 pouce, ce qui scellera partiellement la plaque tout en permettant l’échange de gaz.
Incuber la plaque sur un agitateur de microplaques et mesurer la densité optique à l’aide d’un lecteur de microplaques. Ensuite, avec les mesures de densité optique, générez des courbes de contrôle et de croissance infectées. La courbe de croissance représente une infection productive des phages démontrée par la réduction de l’absorbance bactérienne au fil du temps dans les puits avec le phage ajouté.
Cette réduction de la densité bactérienne ne sera pas observée si la bactérie est en dehors de la gamme d’hôtes du phage.
