ابدأ باستئصال ما لا يقل عن 20 خصية من عذارى بعوض الأنوفيليس في برنامج تلفزيوني معقم. نقل الخصيتين إلى شريحة مجهر نظيفة تحتوي على قطرة جديدة من برنامج تلفزيوني. باستخدام أطراف P1000 المصفاة أو طرف إبرة التشريح ، انقل الخصيتين إلى طبق جنين يحتوي على 3.7٪ فورمالديهايد في PBST.
احتضان لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، اغسل الخصيتين في PBST لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة. نقل الخصيتين إلى طبق الجنين الذي يحتوي على RNase A وحضنها لمدة نصف ساعة عند 37 درجة مئوية.
قم بإزالة محلول الحمض النووي الريبي وأضف ملليلتر واحد من محلول الاختراق. احتضان الخصيتين في محلول اختراق في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. ثم اغسل الخصيتين و PBST مرتين لمدة خمس دقائق لكل منهما.
انقل الخصيتين إلى أنبوب سعة 1.5 ملليلتر يحتوي على 20 إلى 30 ميكرولترا من محلول التهجين باستخدام مسبار الحمض النووي المسمى احتضان الخليط طوال الليل عند 37 درجة مئوية في الظلام للسماح بالتهجين. بمساعدة طرف التجويف الأبيض المصفى AP 1000 ، انقل الخصيتين إلى طبق الجنين ، ثم اغسلهما في اثنين من XSSC لمدة خمس دقائق.
قم بإزالة SSC ثم قم بتركيب الخصيتين على شريحة زجاجية بلورية باستخدام وسيط تركيب متاح تجاريا يحتوي على DAPI. أغلق الشريحة بمادة مانعة للتسرب للغطاء واحتضانها في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة ساعتين. سمح مستوى جيد من التهجين بتصور الكروموسومات المستهدفة في جميع أنحاء تكوين الحيوانات المنوية.
يمكن رؤية اقتران الكروموسومات الجنسية الموصوفة في مرحلتي البريبايوتك والعضل. يمكن تتبع الطلائع المنوية الحاملة ل X أو Y خلال تكوين الحيوانات المنوية التي تتميز بمستويات مختلفة من تكثيف الحمض النووي (DNA) إلى الخطوة الأخيرة من الحيوانات المنوية الناضجة على شكل سهم.