首先,在手术前 30 分钟将美洛昔康皮下注射到 6 至 8 周龄的 C57 Black 6J 雄性小鼠中以缓解疼痛。麻醉小鼠后,捏住脚趾并确认没有反射。在一只眼睛的角膜表面滴一滴0.5%的丙美卡因,在另一只眼睛的角膜表面滴一滴人工泪液。
接下来,使用两毫米活检打孔器,打出沃特曼滤纸盘。将两微升一种普通氢氧化钠加入干净的培养皿中,然后将滤纸盘放在氢氧化钠滴上,使其吸收 15 秒。使用镊子,拿起滤纸并将其涂抹在角膜中心的丙美卡因治疗的眼睛上30秒。
在注射器中用20毫升无菌生理盐水冲洗眼睛。使用一次性软湿巾轻轻擦拭眼睛和周围区域多余的盐水。将鼠标放在温暖的加热垫上的恢复笼中,直到可以走动。
在第 10 天,烧伤后,使用 IR OCT 模式以 30 度视野和 100% IR 强度捕获眼睛前段的 OCT 图像作为体积扫描。角膜新生血管从角膜缘血管向碱烧伤小鼠眼的角膜中心萌发,但在健康眼中则不然。与对照组相比,碱烧伤组的新生血管形成和混浊评分显著升高。
与对照组相比,对血液和淋巴管的角膜进行免疫染色显示,10 天后血管和淋巴管的密度显着更高。使用OCT成像和量化的角膜厚度在烧伤组中显着更高。