Pour commencer, injectez du méloxicam par voie sous-cutanée à la souris mâle C57 Black 6J âgée de six à huit semaines 30 minutes avant la procédure pour soulager la douleur. Après avoir anesthésié la souris, pincez les orteils et confirmez l’absence de réflexe. Appliquez une goutte de proparacaïne à 0,5 % sur la surface cornéenne de l’un et une goutte de larmes artificielles sur l’autre œil.
Ensuite, à l’aide d’un poinçon de biopsie de deux millimètres, perforez des disques de papier filtre watman. Ajoutez deux microlitres d’un hydroxyde de sodium normal dans une boîte de Pétri propre et placez le disque de papier filtre sur la goutte d’hydroxyde de sodium, en la laissant s’imprégner pendant 15 secondes. À l’aide d’une pince, prenez le papier filtre et appliquez-le sur l’œil traité à la proparacaïne au centre de la cornée pendant 30 secondes.
Lavez l’œil en rinçant avec 20 millilitres de solution saline stérile dans une seringue. Essuyez doucement l’excès de solution saline des yeux et de la zone environnante à l’aide de lingettes douces jetables. Placez la souris dans une cage de récupération sur un coussin chauffant chaud jusqu’à ce qu’elle soit ambulatoire.
Le 10e jour, après la brûlure, capturez des images OCT du segment antérieur des yeux sous forme de balayage volumique en utilisant le mode IR OCT avec un champ de vision de 30 degrés et une intensité IR de 100 %. La néovascularisation cornéenne a germé des vaisseaux du limbe vers le centre cornéen dans l’œil de souris brûlé par l’alcali, mais pas dans l’œil sain. Le groupe des brûlures alcalines a démontré des scores de néovascularisation et d’opacité significativement élevés par rapport au groupe témoin.
L’immunomarquage des cornées pour les vaisseaux sanguins et lymphatiques a montré des densités significativement plus élevées de vaisseaux sanguins et de vaisseaux lymphatiques après 10 jours dans le groupe brûlé par rapport au groupe témoin. L’épaisseur de la cornée imagée et quantifiée à l’aide de l’OCT était significativement plus élevée dans le groupe des brûlés.
