Forbered dyr til RNAi-arveanalysen ved at vælge tre eller fire gravide Caenorhabditis elegans voksne under 35 millimeter standard NGM-plader podet med OP50-1-bakterier. Efter fire dage vaskes de gravide voksne orme af pladerne i 1,5 ml rør ved hjælp af 800 mikroliter M9-buffer suppleret med Triton X-100. Gentag vasken og træk ormene i et rør.
Efter centrifugering af ormene ved 1.000 G i 1,5 til to minutter aspireres supernatanten og efterlader 100 mikroliter uden at forstyrre ormpelleten. Til hvert rør indeholdende ormpillen tilsættes 650 mikroliter dobbeltdestilleret vand. For at isolere C.elegans-embryonerne fra den indsamlede befolkning tilsættes 250 mikroliter af den frisklavede blegeopløsning og starter en timer.
Hvert til to minutter hvirvler rørene grundigt. Efter fem minutter overvåges nedbrydningen af voksne orme under stereoskopet. Fortsæt hvirvelstrømmen, indtil ormene er helt opløst, og kun embryoner forbliver.
Dette tager normalt seks til syv minutter. Glassene centrifugeres straks ved 1.000 G i 1,5 minutter, og supernatanten suges til mig, så embryonerne efterlades ca. 50-100 mikroliter supernatant. Tilsæt en milliliter M9-buffer suppleret med Triton X-100 til embryoner og hvirvel.
Centrifuger suspensionen og gentag vasken to gange. Efter den sidste vask suges supernatanten og efterlades ca. 100 mikroliter i glasset. Vortex rørene med isolerede embryoner og pipette to mikroliter fra hvert rør to gange på et mærket glasglas.
Embryonerne tælles ved hjælp af en tælletæller for at estimere koncentrationen af embryoner pr. mikroliter. For at starte en semi-synkroniseret befolkningsvækst overføres ca. 250 embryoner til hver RNAi NGM-plade indeholdende E. coli HT115-bakterier med GFP- eller kontrol-RNAi-vektorer. Lad væsken absorbere.
Inkuber P-naught-generationen behandlet med RNAi i fire dage ved 21 grader Celsius.