Preparare gli animali per il test dell'ereditarietà dell'RNAi prelevando tre o quattro adulti gravidi di Caenorhabditis elegans sotto le piastre NGM standard da 35 millimetri seminate con batteri OP50-1. Dopo quattro giorni, lavare i vermi adulti gravidi dalle piastre in tubi da 1,5 millilitri utilizzando 800 microlitri di tampone M9 integrato con Triton X-100. Ripeti il lavaggio e tira i vermi in un tubo.
Dopo aver centrifugato i vermi a 1.000 G per 1,5-due minuti, aspirare il surnatante lasciando 100 microlitri senza disturbare il pellet di vermi. A ogni tubo contenente il pellet di verme, aggiungere 650 microlitri di acqua bidistillata. Per isolare gli embrioni di C.elegans dalla popolazione raccolta, aggiungere 250 microlitri della soluzione sbiancante appena preparata e avviare un timer.
Ogni uno o due minuti, vorticare accuratamente i tubi. Dopo cinque minuti, monitorare la degradazione dei vermi adulti sotto lo stereoscopio. Continuare a vorticare fino a quando i vermi non si sono completamente sciolti e rimangono solo embrioni.
Questo richiede generalmente dai sei ai sette minuti. Centrifugare immediatamente le provette a 1.000 g per 1,5 minuti e aspirare il surnatante, lasciando circa 50-100 microlitri del surnatante con gli embrioni. Aggiungere un millilitro di tampone M9 integrato con Triton X-100 agli embrioni e al vortice.
Centrifugare la sospensione e ripetere il lavaggio due volte. Dopo il lavaggio finale, aspirare il surnatante e lasciare circa 100 microlitri nella provetta. Far vorticare le provette con gli embrioni isolati e pipettare due microlitri da ciascuna provetta due volte su un vetrino etichettato.
Contare gli embrioni utilizzando un contatore per stimare la concentrazione di embrioni per microlitro. Per avviare una crescita della popolazione semi-sincronizzata, trasferire circa 250 embrioni su ciascuna piastra RNAi NGM contenente batteri E.coli HT115 con GFP o vettori RNAi di controllo. Lasciare assorbire il liquido.
Incubare la generazione di P naught trattata con RNAi per quattro giorni a 21 gradi Celsius.