유리 파스퇴르 피펫을 사용하여 녹인 1% 아가로스 한 방울을 비닐 레코드에 올려 아가로스 패드를 준비하기 시작합니다. 레코드의 선이 수평 또는 수직이 되도록 유리 슬라이드의 방향을 맞추고 슬라이드를 아가로스 방울에 30초 동안 빠르게 놓습니다. 레코드에서 유리 슬라이드를 제거하고 입체경 아래에 갓 준비된 약 5마이크로리터의 5밀리몰 레바미솔을 추가합니다.
벌레가 들어있는 튜브를 부드럽게 튕기고 5-10 마이크로 리터를 아가로스 패드에 옮겨 벌레를 장착합니다. 반복실험당 약 40개의 웜이 있도록 추가되는 웜의 수를 추정합니다. 속눈썹 픽을 사용하여 벌레를 일렬로 정렬하고 슬라이드에 유리 커버슬립을 놓습니다.
표백 프로토콜을 사용하여 나머지 벌레에서 배아를 분리하고 OP50-1 박테리아가 뿌려진 35mm NGM 플레이트에 250개의 배아를 도금합니다. 형광 입체경에서 GFP 필터 세트를 사용하고 탈리 카운터를 사용하여 각 복제에 대한 슬라이드의 GFP 양성 및 GFP 음성 웜 수를 계산하고 기록합니다. 각 세대에 대한 생식세포에서 핵 GFP 신호의 수동 스코어링은 GFP RNAi로 처리된 스코어링된 P0 및 F1 웜에서 전이유전자의 침묵이 완전히 침투한다는 것을 보여주었습니다.
F2 세대에서 GFP 침묵의 유전을 나타내는 인구의 비율은 약 50%F5 세대까지 인구의 대다수는 침묵의 유전을 나타내지 않았습니다. F10 세대까지 모든 웜은 GFP를 발현했으며 유전은 감지되지 않았습니다.