कीड़े युक्त ट्यूब में 1.8% अंतिम एकाग्रता में फॉर्मलाडेहाइड जोड़कर शुरू करें और ट्यूब को छह मिनट के लिए कमरे के तापमान पर घुमाएं। फिर तुरंत तरल नाइट्रोजन में ट्यूबों को फ्रीज करें, और नमूने को 80 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। आगे बढ़ने के लिए फॉर्मलाडेहाइड क्रॉस-लिंक नमूने को कमरे के तापमान पर पानी के स्नान में तीन मिनट के लिए पिघलाएं, और कमरे के तापमान पर 16 मिनट के लिए नमूने घुमाएं।
1.25 मोलर ग्लाइसिन पर 125 मिलीमोलर अंतिम एकाग्रता में, और कमरे के तापमान पर पांच मिनट तक घुमाएं। इस चरण के बाद, नमूने को बर्फ पर, या चार डिग्री पर रखें, और चुंबकीय मोती क्षालन तक बर्फ के ठंडे बफर का उपयोग करें। तीन मिनट के लिए 1000 ग्राम पर नमूने को सेंट्रीफ्यूज करने के बाद, इसे एक मिलीलीटर पीबीएसटीएक्स के साथ तीन बार धो लें।
फिर इसे एक मिलीलीटर रिसस्पेंशन बफर से दो बार धो लें। अंतिम धोने के बाद, यह सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त बफर छोड़ दें कि कुल मात्रा गोली की मात्रा का कम से कम तीन गुना और न्यूनतम 100 माइक्रोलीटर है।
