ابدأ بخلط واقتباس 90 إلى 120 ميكرولتر من عينات C.Elegans المتشابكة من الفورمالديهايد في أنبوب صوتنة البوليسترين. أضف حجما متساويا من المخزن المؤقت لإعادة التعليق الذي يحتوي على منظفات 2X. Sonicate في حمام مائي صوتي لمدة سبع دقائق.
امزج العينة برفق عن طريق السحب وكرر الصوتنة لمدة سبع دقائق إضافية. بمجرد الانتهاء من ذلك ، انقل المحللة الصوتية إلى أنبوب سعة 1.5 ملليلتر. أضف نصف حجم من المخزن المؤقت لإعادة التعليق بدون منظفات.
بعد الطرد المركزي عند 13،000 جم لمدة 15 دقيقة عند أربع درجات مئوية ، قسم المادة الطافية المحللة إلى أربعة أجزاء. قم بتخزين الجزء المحللة المدخلة عند سالب 20 درجة سلزية في أنبوب حجمه 1.5 ملليلتر. أضف 0.5 ميكروغرام من ثلاثي ميثيل مضاد H3K9 أو مضاد هيستون H3 أو IgG إلى عينة الترسيب المناعي أو IP المناسبة.
احتضان التفاعل عند أربع درجات مئوية بين عشية وضحاها مع الدوران. في اليوم التالي ، قم بقسمة تسعة ميكرولترات من الخرزات المغناطيسية المطلية بالبروتين G لكل عينة IP في أنبوب 1.5 ملليلتر. بعد غسلتين مع ملليلتر واحد من FA-150 ، أعد تعليق الخرزات المغناطيسية في المخزن المؤقت FA-150.
بمجرد الانتهاء من ذلك ، أضف 7.5 ميكرولتر من تعليق الخرزة المغناطيسية إلى كل مزيج من الأجسام المضادة IP قبل احتضان الأنابيب عند أربع درجات مئوية لمدة ساعتين مع الدوران. بعد ذلك ، اغسل الخرزات المغناطيسية سبع مرات باستخدام 200 ميكرولتر على الأقل من كل محلول عازل. احتضن كل غسلة عند أربع درجات مئوية لمدة خمس دقائق مع الدوران قبل جمع الخرز على حامل مغناطيسي لشفط الغسيل.
بعد استنشاق آخر غسلة للمخزن المؤقت ، أعد تعليق الخرزات المغناطيسية في 50 ميكرولترا من محلول شطف الكروماتين IP ، وانقله إلى أنبوب سعة 1.5 ملليلتر. بعد سحب العينة في ThermoMixer ، اجمع الخرزات على حامل مغناطيسي وانقل المادة الطافية إلى أنبوب جديد. كرر الشطف مع 50 ميكرولتر أخرى من محلول شطف الترسيب المناعي للكروماتين.
بمجرد الانتهاء من ذلك ، اسحب ما مجموعه 100 ميكرولتر من المادة الطافية قبل الشروع في الربط المتقاطع العكسي وشطف الحمض النووي.