Börja med att förbereda droppar M2 IBMX Medium i en plastvävnadsodlingsskål och placera skålen på ett varmt block vid 37 grader Celsius i minst 30 minuter innan äggcellisolering. Dissekera äggstockarna på de avlivade mössen och placera dem i ett fem milliliters runt bottenrör med M2 IBMX. Överför äggstockarna till ett plastlock som innehåller 1,5 milliliter M2 IBMX.
Ta bort eventuell fettvävnad runt äggstockarna eller äggledarsegment och frigör cumulus-oocytkomplexen genom mekanisk perforering av äggstockarna med en 27-gauge nål. Överför cumulus-oocytkomplexen till en odlingsskål med droppar M2 IBMX. Och ta bort cumuluscellerna genom upprepad pipettering med en smalborrad glasbetespipett.
Välj den omgivna germinalvesikeln eller oocyterna i GV-stadiet och överför dem i en droppe M2 IBMX-medium på ett varmt block vid 37 grader Celsius skyddat från ljus. Efter att ha inducerat dubbelsträngsbrott med etoposid placeras GV-oocyterna i droppar av det genotoxiska medlet i en timme på det heta blocket i mörker. Tillsätt droppar M16-odlingsmedium kompletterat med 400 mikromolar IBMX till oocyterna för att hålla dem stoppade under en längre period.
Placera oocyterna i en inkubator vid 37 grader Celsius och 5% koldioxid.