Skriv ut ett recept som innehåller vägningsingredienser för konstgjord dietberedning. Väg alla torra ingredienser, utom agar, i en behållare. Lägg blandningen av torra ingredienser i en mixer och tillsätt fem milliliter linfröolja till ingrediensblandningen.
Blanda 15 gram finmaskig agar för varje dietsats med 400 ml destillerat vatten i en en-liters bägare. Värm blandningen i en mikrovågsugn tills agar är nära kokning, med fina bubblor i hela blandningen. Efter kokning, tillsätt 400 ml destillerat vatten med krantemperatur för att sänka temperaturen för att blanda med de torra ingredienserna.
Lägg sedan 74-ounce dietkoppar på disken med kanterna vidrörande. Tillsätt agarblandningen i mixern och blanda noggrant. Häll blandningarna i dietkoppar efter blandning och se till att kosten täcker botten av varje kopp.
När kosten har svalnat, lägg lock på kopparna. Märk kopparna med diettyp och stapla dem på brickor. Husvärdväxtblad med fjärilägg i 30-uns delikoppar med ett nätskydd inuti en 24-graders Celsius klimatkammare.
Efter en vecka, inspektera kopparna för sena första eller tidiga andra instar larver. Använd en pensel och överför larverna till den konstgjorda kosten. Placera tre larver i varje fyra uns kopp.
Placera kopparna på sidorna i en plastbehållare, så att frass kan falla till botten och bort från kosten, vilket minskar mögel och sjukdomsrisk. Hus dietkopparna i kontrollerade temperaturförhållanden med låga till måttliga ljusnivåer. Övervaka kopparna för mögel eller sjukdom varannan till varannan dag genom att inspektera genom de klara kopplocken.
Låt larverna förpuppas och dyka upp i dietkopparna. Ta försiktigt bort vuxna fjärilar från kopparna med rena händer och greppa alla fyra vingarna nära kroppen för ett stabilt grepp. För att markera fjärilarna, håll de torra individerna i huvudet och bröstkorgen.
Markera sedan ett nummer på bakvingen med en finspetssharpie. Bestäm fjärilarnas kön genom att kombinera vingmarkeringar och könsundersökningar. Ta sedan tag i den vuxna i huvudet och bröstkorgen med ena handen medan du öppnar ett vaxglassinhölje med den andra handen.
Överför sedan den vuxna till kuvertet och säkra vingarna genom kuvertet. Håll fjärilarna vid fem till sex grader Celsius i upp till en vecka före experiment. I denna fallstudie påverkades inte fjärilens överlevnad av att öka koncentrationen av nickel, men det fanns en signifikant effekt för både koppar och zink.
Fjärilens utvecklingshastighet påverkades av koppar och zink. När kopparkoncentrationen ökade ökade utvecklingstiden, med en signifikant avvikelse från kontrollen som började vid 50 ppm. När zinkkoncentrationen ökade ökade utvecklingstiden, med en signifikant avvikelse från kontrollen som började vid 100 ppm.