要使用血小板受体激动剂胶原相关肽交联或 CRPXL 开始测定，请在测定缓冲液中将适量的 CRPXL 原液稀释至适合诱导最大血小板聚集的浓度。所得溶液在下文中将称为标准。接下来，从相同的最高制备浓度开始，依次对标准品和测试试剂进行两倍连续稀释。
在测定缓冲液中为测试品和标准品准备 6 到 8 点稀释系列，以产生从 100% 到 0% 的聚集响应当富含血小板的血浆或 PRP 准备好使用时，将等分试样的 PRP 添加到透光聚集比色皿中。让样品在保温孔中加热至 37 摄氏度几分钟。适当加热后，将比色皿放入聚集计中以开始记录迹线。
在不断搅拌下，加入激动剂，并记录数据。对标准品和测试试剂的每种制备稀释液进行数据收集。使用Graphpad Prism或任何合适的软件包来检查标准品和测试品的浓度曲线是否平行。
输入数据，使 x 轴包含浓度，y 轴包含由最大聚集百分比或曲线下面积指示的响应。接下来，将浓度值转换为相应的对数或对数浓度。从分析函数中选择非线性回归，并使用剂量反应刺激方程。
选择对数激动剂与响应变量斜率，并使用三向或四向拟合，具体取决于哪种拟合最适合数据。通过单击比较选项卡并比较数据集来确定生成的曲线是否平行。确保测试的斜率和渐近线以及标准曲线是等效的。
如果满足这些条件，则继续使用非线性回归曲线拟合计算效力或 EC50。通过将标准的EC50值除以测试值来计算相对效力。调整测试试剂的单位体积浓度质量数，以考虑相对于标准品的效力差异。
标准品和测试试剂的血小板聚集迹线揭示了两种聚集反应之间的差异。在每毫升0.075微克时，对标准品有明确的反应，而对于测试，相应的浓度没有反应。通过绘制浓度响应曲线来计算标准品和测试试剂的EC50值。
