Etter å ha forberedt musen for kirurgi, identifiser målområdet, syv millimeter til venstre for brystbenet og omtrent syv millimeter over subkostalmarginen. Løft huden over det identifiserte området ved hjelp av tang og lag et 10 millimeter sirkulært snitt ved hjelp av skarp mikrodissekerende saks for å kutte bare huden. Fjern deretter det myke vevet over ribbeholderen og cauterize eventuelle store blodkar i begge ender ved hjelp av en cautery penn.
Løft den sjette eller syvende ribben med tang og bruk et enkelt blad av den stumpe mikrodissekerende saksen for å stikke hull i interkostalmuskelen. Roter saksen forsiktig og gjør et snitt på omtrent 10 millimeter i interkostalrommet mens du unngår kontakt med lungevevvet og ribbeina. Slipp trykkluft ved håndleddet eller hånden forsiktig for å bestemme passende strømningsstyrke og tømme dysen for rusk.
Påfør deretter korte utbrudd av luft ved snittet for å unngå å forårsake lungeskade. Med tangen, løft den sjette eller syvende ribben og sett tilbaketrekkeren inn i interkostalsnittet med kniver parallelt med brystveggen. Slipp deretter håndtaket forsiktig for å la retractoren åpne og avsløre lungen gradvis.
Påfør nå to til tre dråper steril PBS oppvarmet til 37 grader på det eksponerte lungevevvet for å forhindre at det tørker ut. Legg et stykke aluminiumsfolie med en liten utskjæring over musen, plasser den direkte over det eksponerte lungevevvet. Sørg for at utskjæringen bare viser den åpne brystkassen og det nærliggende vevet for målrettet lungefotokonvertering.
Plasser deretter en boks med en utskjæring over musen og aluminiumsfolien, slik at utskjæringen stemmer overens med den eksponerte lungen. Og sett fotokonverteringslampen rett over utskjæringen på esken. Aktiver deretter fotokonverteringslampen for å belyse det eksponerte lungevevet i et kontinuerlig spenn på seks minutter.
Etter fotokonvertering, deaktiver lampen og fjern lampeboksen og aluminiumsfoliemasken vekk fra musen. Separer lungen fra brystveggen ved å tømme luft ved håndleddet, og deretter tømme luft ved brystsnittet. Ta godt tak i tilbaketrekkingshåndtaket og klem det for å lukke bladene.
Forsiktig manøvrere den lukkede retractoren ut av interkostalrommet, og sørg for ikke å kontakte lungevevvet. Bruk deretter 5-0 silkesuturen til å lukke interkostalsnittet med et enkelt kontinuerlig suturmønster, slik at ribben på begge sider av snittet er innlemmet. Trekk suturen godt for å sikre at sårkantene justeres, og gjenopprett brystveggens integritet.
Fest suturen ved å knyte enden fire ganger. Trim suturhalene så nær knuten som mulig, og lukk huden ved hjelp av kirurgiske stifter. For å fjerne overflødig luft fra brysthulen, sett inn en milliliter sprøyte med en 28 gauge nål under xiphoidprosessen.
Trekk sprøyten tilbake til ca. en milliliter. Fjern sprøyten fra musen og tøm ut luften. Bilder av eksponert Dendra2 som uttrykker lungemetastaser før eksponering for blått lys vises.
Eksponering av Dendra2 som uttrykker lungemetastaser for blått lys viste at seks minutters eksponering ga det lyseste signalet i den fotokonverterte kanalen i både ex vivo- og in vivo-prøver. Fotokonverterte og ikke-fotokonverterte celler ble identifisert i alle tre vevstyper fra mus som gjennomgikk kirurgi med eksponering for blått lys. Bare ikke-fotokonverterte tumorceller ble funnet i vev av mus som gjennomgikk kirurgi uten eksponering for blått lys.